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更新時(shí)間:2024-11-04
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產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠胰島β細(xì)胞
組織來(lái)源:胰腺組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠胰島β分離自胰腺組織;胰腺分為外分泌腺和內(nèi)分泌腺兩部分。外分泌腺由腺泡和腺管組成,腺泡分泌胰液,腺管是胰液排出的通道。胰液中含有、原、脂肪酶、等。胰液通過(guò)胰腺管排入十二指腸,有消化蛋白質(zhì)、脂肪和糖的作用。內(nèi)分泌腺由大小不同的細(xì)胞團(tuán)──胰島所組成,胰島主要由4種細(xì)胞組成:α細(xì)胞、β細(xì)胞、γ細(xì)胞及PP細(xì)胞。α細(xì)胞分泌胰高血糖素,升高血糖;β細(xì)胞分泌胰島素,降低血糖;γ細(xì)胞分泌,以旁分泌的方式抑制α、β細(xì)胞的分泌;PP細(xì)胞分泌胰多肽,抑制胃腸運(yùn)動(dòng)、胰液分泌和膽囊收縮。胰島β細(xì)胞,即胰島B細(xì)胞,是胰島細(xì)胞的一種,屬內(nèi)分泌細(xì)胞的一種,能分泌胰島素,與胰島α細(xì)胞分泌的胰高血糖素一起起到調(diào)節(jié)血糖的作用。胰島B細(xì)胞功能受損、胰島素分泌絕對(duì)或相對(duì)不足(胰島素抵抗),會(huì)使血糖升高,從而引發(fā)糖尿病。而胰島B細(xì)胞癌變會(huì)生成胰島素瘤,引起惡性血糖降低癥狀。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰島β采用先用膠原酶消化分離得到胰島、再用逐級(jí)消化胰島制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠胰島β經(jīng)Insulin含量檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。⒓?xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠細(xì)胞蛋白(CC16)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體(sAIL)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性血小板內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(sPECAM-1/sCD31)試劑盒 96T/48T
小鼠可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T
小鼠B12(VB12)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human squamous cell carcinoma aigen 2 (SCCAg-2) ELISA Kit 人鱗狀上皮細(xì)胞癌抗原2(SCCAg-2)試劑盒
HumanOrexinB,OX-BELISAKit 人食欲素/阿立新B(OX-B)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenL-Phenylalanineammonla-lyase,PAL試劑盒雞L苯解氨酶(PAL)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞MYC蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseGamma-aminobyricacid,GABAELISAKit小鼠γ氨基(GABA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
Ephrin-B2抗體
多巴胺受體相互作用蛋白5單克隆抗體
GSK3B重組小鼠 GSK3B 蛋白 Protein
POTE錨蛋白域家族成員G(POTEG)重組蛋白 Recombinant POTE Ankyrin Domain Family, Member G (POTEG)
TNFRSF19重組人 TNFRSF19 / TROY 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
CEACAM3 Protein Human 重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白
PDCD1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 PD1 / PDCD1 / CD279 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
骨成型蛋白2(BMP2)重組蛋白 Recombinant Bone Morphogenetic Protein 2 (BMP2)
CEACAM3 Protein Human 重組人 CEACAM3 / CD66d 蛋白
CXADR重組小鼠 CXADR / CAR 蛋白 Protein
TGFB2 Protein Canine 重組狗 TGFB2 / TGF-beta 2 蛋白
PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白 (aa 30-390, His & GST 標(biāo)簽) Protein
小鼠胰島β細(xì)胞大鼠催產(chǎn)素受體(OX)試劑盒 ,英文名: OX ELISA Kit
P cadherin / placeal cadherin (P-cad) ELISA Kit 人P鈣黏蛋白/胎盤(pán)鈣黏蛋白(P-cad)試劑盒
Ratbrainnaiureticpeptide,BNPELISAKit 大鼠腦素/腦尿肽(BNP)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforCTGF(Humanconnectivetissuegrowthfactor)ELISAKit人結(jié)締組織生長(zhǎng)因子
細(xì)胞糖原0酸化酶(GLYCOGENPHOSPHORYLASE)活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒10次
Ratendotoxin,ETELISAKit大鼠內(nèi)毒素(ET)試劑盒規(guī)格:96T/48T
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