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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-11-05
小鼠卵泡基膜細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
卵巢 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X8513 |
細胞簡介:
小鼠卵泡基膜(卵泡膜細胞)分離自卵巢組織;卵巢是雌性動物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側發(fā)育(右側已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關。大多數(shù)脊椎動物有兩個卵巢,但是部分魚類的兩個卵巢融合為單個結構,而所有鳥類只有左側卵巢有機能。卵巢是位于子宮兩側的一對卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結締組織。卵巢的內(nèi)部結構可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周圍部分,主要由卵泡和結締組織構成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結締組織構成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。哺乳動物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關激素的調(diào)節(jié)才能完成,垂體素(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開始發(fā)育,其過程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細胞和卵泡膜細胞在垂體素的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細胞合成的雄激素透過基膜進入顆粒細胞,并轉變?yōu)榇萍に?。因此,卵泡膜細胞在生殖?nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對于與性激素有關的婦產(chǎn)科疾病(如多囊卵巢綜合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動物卵泡生長發(fā)育的過程中,卵母細胞由不斷增加的顆粒細胞層包裹。卵巢組織中的膜細胞作為卵泡的外層細胞可以維持卵泡結構的完整性,參與構成卵母細胞和顆粒細胞發(fā)育的微環(huán)境且為類固醇激素的生成提供底物。在哺乳動物中調(diào)節(jié)膜細胞類固醇激素生成的機制已見相關報道,但是有關卵泡膜細胞的聚集、生長和分化的研究尚不深入。
方法簡介:
實驗室分離的小鼠卵泡基膜采用先機械分離后膠原酶消化結合Percoll密度梯度離心法、并通過專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的小鼠卵泡基膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎培養(yǎng)基,含FBS、EGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳3代左右
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠卵泡基膜體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠β細胞素(BTC)試劑盒
小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)試劑盒
小鼠β葡糖苷酶(β-glucosidase)試劑盒
小鼠β酚(β-naphthol)LISA試劑盒
PE標記人CD1a單克隆抗體
快速發(fā)育生長因子同源蛋白2抗體
APCS重組小鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein
CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2 0.5mgCNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗原
BNIP3L重組人 BNIP3L 蛋白 Protein
F3 Protein Human 重組人 Coagulation Factor III / Tissue Fac僀?僀
CNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2 0.5mgCNGA2(Cyclic Nucleotide Gated Cation Alpha 2) 環(huán)核苷酸陽離子通道蛋白α2抗原
F3 Protein Human 重組人 Coagulation Factor III / Tissue Factor / CD142 蛋白 (Fc 標簽)
APCS重組小鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein
FZD1 Protein Mouse 重組小鼠 Frizzled-1 / FZD1 蛋白
BNIP3L重組人 BNIP3L 蛋白 Protein
小鼠橫紋肌輔肌動蛋白α (sm Actinin-α)ELISA pcr檢測試劑盒
Rat thioredoxin (x) ELISA Kit 大鼠硫氧化還原蛋白(x)試劑盒
humanUlasensitivityThyroxine,u-T4ELISAKit 人高敏甲狀腺素(u-T4)pcr檢測試劑盒分裝
humanai-neuophilcytoplasmicaibody,cANCA試劑盒人抗中性粒細胞胞漿抗體(cANCA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒(包括抗體)10次
humanulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit人高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠卵泡基膜細胞大鼠淋巴毒素β(LTβ)試劑盒 ,英文名: LTβ ELISA Kit
Mouse inhibin A (INH-A) ELISA Kit 小鼠抑制素A(INH-A)試劑盒
RatEndomeiumAibody,EMAbELISAKit 大鼠抗子宮內(nèi)膜抗體(EMAb)pcr檢測試劑盒分裝
CLIAKitforGamma-ECS(HumanGamma-glamylsysteinesyhetase)ELISAKit人γ谷氨酰半胱合成酶
細胞骨架(肌動蛋白微絲;F-ACTIN)綠色熒光染色試劑盒10次
RatProstaticAcidPhosphatase,PAPELISAKit大鼠前列腺酸性0酸酶(PAP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
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