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更新時(shí)間:2024-11-04
小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
小腸組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7585 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠小腸Cajal間質(zhì)分離自小腸組織;小腸位于腹中,上端接幽門與胃相通,下端通過闌門與大腸相連,是食物消化吸收的主要場(chǎng)所。小腸盤曲于腹腔內(nèi),上連胃幽門,下接盲腸,分為十二指腸、空腸和回腸三部分。小腸內(nèi)消化是至關(guān)重要的,因?yàn)槭澄锝?jīng)過小腸內(nèi)胰液、膽汁和小腸液的化學(xué)性消化及小腸運(yùn)動(dòng)的機(jī)械性消化后,基本上完成了消化過程,同時(shí)營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)被小腸粘膜吸收了。小腸管壁由粘膜、粘膜下層、肌層和漿膜構(gòu)成。其結(jié)構(gòu)特點(diǎn)是管壁有環(huán)形皺襞,粘膜有許多絨毛,絨毛根部的上皮下陷至固有層,形成管狀的腸腺,其開口位于絨毛根部之間。絨毛和腸腺與小腸的消化和吸收功能關(guān)系密切;構(gòu)成腸腺的細(xì)胞有柱狀細(xì)胞、杯狀細(xì)胞、潘氏細(xì)胞和未分化細(xì)胞。柱狀細(xì)胞和內(nèi)分泌細(xì)胞與絨毛上皮相似,接近絨毛的柱狀細(xì)胞與吸收細(xì)胞相似,絨毛深部的柱狀細(xì)胞微絨毛少而短,不形成紋狀緣。Cajal間質(zhì)細(xì)胞(ICC)是一類主要分布于胃腸道的間質(zhì)細(xì)胞,是胃腸道的起搏細(xì)胞和信號(hào)傳導(dǎo)細(xì)胞,與肌細(xì)胞以及末梢神經(jīng)元有著緊密的關(guān)系,具有激發(fā)和促進(jìn)胃腸蠕動(dòng)的作用。借助于電子顯微鏡技術(shù),清楚觀察到了ICC位置分布和內(nèi)部精細(xì)結(jié)構(gòu);應(yīng)用免疫熒光等生化技術(shù),發(fā)現(xiàn)了其特殊表達(dá)的c-kit蛋白;利用電生理技術(shù),得知多種胃腸動(dòng)力障礙疾病也與其異常有關(guān)。多年來,學(xué)者逐漸在胃腸道、膽道、膀胱、子宮等部位發(fā)現(xiàn)了ICC的蹤跡,并試圖闡述其與某些疾病的發(fā)生機(jī)制。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸Cajal間質(zhì)采用膠原酶消化法結(jié)合組織貼塊法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠小腸Cajal間質(zhì)經(jīng)c-kit免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 英文名稱: Angiotensin Conveing Enzyme 規(guī)格: 英文縮寫: ACE
小鼠雄激素結(jié)合蛋白 英文名稱: Androgen Binding Protein 規(guī)格: 英文縮寫: ABP
小鼠促上腺皮質(zhì)激素 英文名稱: Adrenocor Ticoopic Hormore 規(guī)格: 英文縮寫: ACTH
小鼠半胱天冬蛋白酶-3 英文名稱: cysteine-aspaic acid protease-3 規(guī)格: 英文縮寫: Active Caspase-3
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(PAP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human lymphotoxin beta (LTB) ELISA Kit 人淋巴毒素β(LTB)試劑盒
Humancholineacetylase,CHAcELISAKit 人乙?;?span>(CHAc)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Chickengrowthhormone,GH試劑盒雞生長(zhǎng)激素(GH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞CASPASE-8蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
Mousehemeoxygenase1,HO-1ELISAKit小鼠血紅素氧合酶1(HO-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
6號(hào)染色體開放閱讀框93抗體
α-甘露糖苷酶2x抗體
REG3D重組小鼠 REG3D 蛋白 Protein
Aggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原 0.5mgAggrecan 軟骨蛋白聚糖/可聚蛋白多糖抗原
C7重組人 C7 / Complement component 7 蛋白 Protein
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
IFNA4 Protein Rat 重組大鼠 IFNA4 / IFNα4 / Interferon alpha-4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
玻連蛋白(VTN)重組蛋白 Recombinant Vitronectin (VTN)
CD96 Protein Human 重組人 CD96 蛋白
CNDP1重組小鼠 CNDP1 蛋白 Protein
RBP4 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 RBP4 蛋白
PPCDC重組人 PPC-DC / PPCDC 蛋白 Protein
小鼠小腸Cajal間質(zhì)細(xì)胞大鼠蛋白聚糖4(PRG4)試劑盒 ,英文名: PRG4 ELISA Kit
Pig angiopoietin 1 (ANG-1) ELISA Kit 豬血管生成素1(ANG-1)試劑盒
病毒H5N1亞型核酸試劑盒(熒光PCR法) 48T
CLIAKitforLptn/LTN/XCL1ELISAKit大鼠淋巴細(xì)胞趨化因子
通用免疫化學(xué)封閉溶液100毫升
ELISAKitSIgA雞分泌型免疫球蛋白A
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