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更新時(shí)間:2024-11-04
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產(chǎn)品名稱(chēng):小鼠三叉神經(jīng)元細(xì)胞
組織來(lái)源:三叉神經(jīng)組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 神經(jīng)元細(xì)胞樣
傳代特性 屬于終末分化細(xì)胞;屬于不增殖細(xì)胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠三叉神經(jīng)元分離自三叉神經(jīng)組織;三叉神經(jīng)為最粗大的混合性腦神經(jīng),含一般軀體感覺(jué)和特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)兩種纖維。其特殊內(nèi)臟運(yùn)動(dòng)纖維起于腦橋中段的三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)核,纖維組成三叉神經(jīng)運(yùn)動(dòng)根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處出腦,位于感覺(jué)根下內(nèi)側(cè),最后進(jìn)入三叉神經(jīng)第3支下頜神經(jīng)中,經(jīng)卵圓孔出顱,隨下頜神經(jīng)分支分布于咀嚼肌等。運(yùn)動(dòng)根內(nèi)還含有三叉神經(jīng)中腦核有關(guān)的纖維,主要傳導(dǎo)咀嚼肌的本體感覺(jué)。三叉神經(jīng)內(nèi)以軀體感覺(jué)神經(jīng)纖維為主,這些纖維的細(xì)胞體位于三叉神經(jīng)節(jié)(半月節(jié))內(nèi),該神經(jīng)節(jié)位于顱中窩顴骨巖部的前面三叉神經(jīng)壓跡處,為硬腦膜形成的美克爾腔包裹。三叉神經(jīng)節(jié)由假單極神經(jīng)元組成,其中樞突集中構(gòu)成了粗大的三叉神經(jīng)感覺(jué)根,由腦橋基底部與腦橋臂交界處入腦,止于三叉神經(jīng)諸感覺(jué)核,其中傳導(dǎo)痛溫覺(jué)的纖維主要終止于三叉神經(jīng)脊束核;傳導(dǎo)觸覺(jué)的纖維主要終止于三叉神經(jīng)腦橋核。三叉神經(jīng)節(jié)細(xì)胞的周?chē)唤M成三叉神經(jīng)三大分支,即第1支眼神經(jīng)、第2支上頜神經(jīng)、第3支為下頜神經(jīng)。從3大分支不斷分支分布于面部皮膚、眼及眶內(nèi)、口腔、鼻腔、鼻旁竇的粘膜、牙、腦膜等,傳導(dǎo)痛、溫、觸等多種感覺(jué)。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠三叉神經(jīng)元采用消化法結(jié)合神經(jīng)元專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)、化學(xué)試劑抑制法篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠三叉神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
血管緊張素1 英文名稱(chēng): Human Angiotensin 1 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): AT1
血管緊張素2受體1抗體 英文名稱(chēng): Human Angiotensin 2 receptor 1 aibody 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): AT2R1-Ab
血管緊張素2受體1型 英文名稱(chēng): Human Angiotensin 2 receptor Type 1 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): AG2
血管緊張素2 英文名稱(chēng): Human Angiotensin 2 規(guī)格: 英文縮寫(xiě): Ang 2/AT2
小鼠乙型肝表面抗原(HBsAg)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human soluble cluster of differeiation 21 (CR2/sCD21) ELISA Kit 人可溶性白細(xì)胞分化抗原21(CR2/sCD21)試劑盒
Humancytokeratin20,CK-20ELISAKit 人細(xì)胞角蛋白20(CK-20)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor6-keto-PGF1aELISAKit大鼠6同前列腺素F1a
飲料D-乳酸比色法定量試劑盒20次
Mousemajorhistocompatibilitycomplex-Ⅱ,MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISAKit小鼠主要組織相容性復(fù)合體Ⅱ類(lèi)(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ試劑盒規(guī)格:96T/48T
PE標(biāo)記小鼠CD54/ICAM-1單克隆抗體
ICEBERG蛋白抗體
BGN重組小鼠 Biglycan / PG-S1 / BGN 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
肝脂酶(LIPC)重組蛋白 Recombinant Lipase, Hepatic (LIPC)
PDHA1重組人 PDHA1 / C54G1 蛋白1 (aa 30-390) Protein
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白
THPO Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 Thrombopoietin / THPO / TPO 蛋白
CGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP 0.5mgCGRP (calcitonin gene related peptide, CGRP) 降鈣素基因相關(guān)肽
CCL7 Protein Human 重組人 MCP-3 / CCL7 蛋白
CD28重組小鼠 CD28 蛋白 (His & Fc 標(biāo)簽) Protein
MBL1 Protein Mouse 重組小鼠 MBL1 蛋白
CMBL重組人 CMBL 蛋白 Protein
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Porcine macrophage inflammatory protein 1 alpha (MIP-1 alpha /CCL3) ELISA Kit 豬巨噬細(xì)胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒
轉(zhuǎn)基因植物PRSV基因核酸試劑盒(PCR-熒光探針?lè)?span>) 48T
CLIAKitforMAPKAPK3(Humanmitogen-activatedproteinkinase-activatedproteinkinase3)ELISAKit人促分裂素原活化蛋白激酶激活的蛋白激酶3
體液氧化應(yīng)激活性氧(ROS)魯米諾化學(xué)發(fā)光法定量試劑盒50次
ELISAKitMrNV羅氏沼蝦諾達(dá)病毒
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作