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更新時(shí)間:2024-11-07
小鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
視網(wǎng)膜 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X8529 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
小鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)分離自視網(wǎng)膜組織;視網(wǎng)膜居于眼球壁的內(nèi)層,是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺(jué)層組成,兩層間在病理情況下可分開(kāi),稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡(luò)膜緊密相連,由色素上皮細(xì)胞組成,它們具有支持和營(yíng)養(yǎng)光感受器細(xì)胞、遮光、散熱以及再生和修復(fù)等作用。組織學(xué)上視網(wǎng)膜分為10層,由外向內(nèi)分別為:色素上皮層、視錐、視桿細(xì)胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內(nèi)顆粒層、內(nèi)叢狀層、神經(jīng)節(jié)細(xì)胞層、神經(jīng)纖維層、內(nèi)界膜。星形膠質(zhì)細(xì)胞為中樞神經(jīng)系統(tǒng)中的伙伴神經(jīng)元提供多種支持功能,如發(fā)育過(guò)程中的神經(jīng)引導(dǎo)、終生的營(yíng)養(yǎng)和代謝支持。大量研究表明,星形膠質(zhì)細(xì)胞是中樞神經(jīng)系統(tǒng)中功能多樣的細(xì)胞群之一。腦卒中和其他損傷時(shí),正常星形膠質(zhì)細(xì)胞功能受損可嚴(yán)重影響神經(jīng)元存活。視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞對(duì)神經(jīng)元的穩(wěn)態(tài)和視網(wǎng)膜的功能至關(guān)重要。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)采用酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的小鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)經(jīng)GFAP免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:基礎(chǔ)培養(yǎng)基,含FBS、EGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):梭形、多角形
傳代特性:可傳2-3代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
小鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠骨保護(hù)素配體(mouse OPGL) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
小鼠血小板活化因子(mouse PAF) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
小鼠纖溶酶抗纖溶酶復(fù)合物(mouse PAP) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
小鼠血小板相關(guān)抗體IgG(mouse PAIgG) 作用: ELISA 試劑盒 組裝/原裝
信號(hào)傳導(dǎo)T淋巴細(xì)胞活化相關(guān)蛋白抗體
Myc tag標(biāo)簽單克隆抗體
CCL3重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein
CX36 (Connexin-36 0.5mgCX36 (Connexin-36) 間隙連接蛋白36抗原
GPR56重組人 GPR56 / TM7LN4 蛋白 Protein
DUSP14 Protein Human 重組人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)
F7 Protein Mouse 重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
CX36 (Connexin-36 0.5mgCX36 (Connexin-36) 間隙連接蛋白36抗原
DUSP14 Protein Human 重組人 DUSP14 / MKP-6 蛋白 (His & MBP 標(biāo)簽)
CCL3重組大鼠 CCL3 / Mip1a 蛋白 Protein
F7 Protein Mouse 重組小鼠 Coagulation Factor VII / FVII / F7 蛋白
GPR56重組人 GPR56 / TM7LN4 蛋白 Protein
小鼠抗利尿激素/血管加壓素/精酸加壓素(ADH/VP/AVP)ELISA pcr檢測(cè)試劑盒
Rat ai sperm aibody (AsAb) ELISA Kit 大鼠抗抗體(AsAb)試劑盒
HumanconcanavalinA,ConAELISAKit 人刀A(ConA)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
Humanangiopoietin-likeprotein3,ANGPTL3試劑盒人血管生成素樣蛋白3(ANGPTL3)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物鈣ATP酶(Ca++-ATPase)活性比色法定量試劑盒20次
IL-1αELISAKit魚類白介素1α(IL-1α)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠視網(wǎng)膜星形膠質(zhì)細(xì)胞大鼠鐵反應(yīng)元件結(jié)合蛋白2(IREB2)試劑盒 ,英文名: IREB2 ELISA Kit
Mouse myeloperoxidase specificity of ai neuophil cytoplasmic aibody IgG (MPO-ANCA IgG)ELISA Kit 小鼠髓過(guò)氧化物酶特異性抗中性粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體IgG(MPO-ANCA IgG)試劑盒
RatFreeThyroxine,FT4ELISAKit 大鼠游離甲狀腺素(FT4)pcr檢測(cè)試劑盒分裝
CLIAKitforHO-1(Mousehemeoxygenase1)ELISAKit小鼠血紅素氧合酶1
細(xì)胞PKCβ1激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
大鼠N-乙?;?span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯大鼠N-乙酰基-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯大鼠N-乙?;?span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯
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