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訪(fǎng)問(wèn)量：636

更新時(shí)間：2024-11-05

大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞

商品屬性：

細(xì)胞簡(jiǎn)介：

大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維分離自關(guān)節(jié)囊組織；關(guān)節(jié)囊（articular capsule）是由結(jié)締組織構(gòu)成的膜囊，附著于關(guān)節(jié)的周?chē)?，密封關(guān)節(jié)腔。關(guān)節(jié)囊的壁共有兩層：外層為纖維層；內(nèi)層為滑膜層。纖維層實(shí)際上是一個(gè)連結(jié)骨的骨膜向另一骨骨膜的移行。纖維層厚而堅(jiān)韌，由致密結(jié)締組織構(gòu)成，含有豐富的血管和神經(jīng)。其淺層纖維多呈縱行排列；深層纖維主要為環(huán)行纖維。纖維層的厚薄，各個(gè)關(guān)節(jié)不相同，即是在同一關(guān)節(jié)中，各部也不一致一般在運(yùn)動(dòng)范圍小的或是負(fù)重較大的關(guān)節(jié)中，都較厚而緊張，相反，于運(yùn)動(dòng)靈活的關(guān)節(jié)，則較薄而松弛。有的關(guān)節(jié)囊的部分纖維囊缺如，僅一層滑膜層；有的部分明顯增厚，形成韌帶?；颖《釢?rùn)，是由疏松結(jié)締組織構(gòu)成，襯在纖維層內(nèi)面，周緣附著在關(guān)節(jié)軟骨的邊緣。它朝向關(guān)節(jié)腔的內(nèi)面光而發(fā)亮，此面上蓋有一層內(nèi)皮細(xì)胞?；は蜿P(guān)節(jié)腔分泌滑液，滑液是稍粘稠而透明的液體，可減少關(guān)節(jié)中相連骨的摩擦，是一種滑潤(rùn)劑?；け砻婵尚纬山q毛或皺襞突入關(guān)節(jié)腔內(nèi)。有時(shí)滑膜層可以穿過(guò)纖維層呈囊狀向外膨出，形成滑膜囊，常位于肌腱與骨面之間。有時(shí)滑膜層突出不明顯，僅呈深窩狀，稱(chēng)為囊狀隱窩。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時(shí)期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來(lái)；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動(dòng)旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動(dòng)，在一定條件下，它可以實(shí)現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對(duì)不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開(kāi)始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長(zhǎng)，不聚集成團(tuán)；細(xì)胞生長(zhǎng)迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長(zhǎng)，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。

方法簡(jiǎn)介：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維采用混合酶消化結(jié)合差速貼壁法制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息：

培養(yǎng)基：基礎(chǔ)培養(yǎng)基，含FBS、bFGF、Insulin、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率：每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性：貼壁

細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣

傳代特性：可傳3代左右

消化液：0.25%

培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%

大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專(zhuān)用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。

細(xì)胞傳代及凍存：

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：

　　① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

公司正在出售的產(chǎn)品：

小鼠低氧誘導(dǎo)因子1α(mouse HIF-1α)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

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小鼠結(jié)合珠蛋白/觸珠蛋白(Hpt/HP)ELISA 試劑盒 96T/48T

Human papilloma virus aibody IgG (HPV-IgG) ELISA Kit 人狀瘤病毒抗體IgG(HPV-IgG)試劑盒

Huma-cellacelymphoblasticleukemiaaigen,TALLA-1ELISAKit 人T細(xì)胞急性淋巴母細(xì)胞白血病相關(guān)抗原(TALLA-1/CD231)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humanai-cardiolipinaibodyIgM,ACA-IgM試劑盒人抗心0脂抗體IgM(ACA-IgM)試劑盒規(guī)格：96T/48T

植物黑色素含量比色法定量試劑盒20次

Humanα-enolase,αENOLELISAKit人α烯醇化酶(αENOL)試劑盒規(guī)格：96T/48T

胞漿蛋白SH3GL3抗體

磷酸化14-3-3E蛋白抗體

CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

神經(jīng)肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)

PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

神經(jīng)肽S(NPS)重組蛋白 Recombinant Neuropeptide S (NPS)

EFNA3 Protein Human 重組人 Ephrin-A3 / EFNA3 蛋白

CSF3R重組人 G-CSFR / CD114 / CSF3R 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HA Protein H5N1 重組甲型流感 H5N1 (A/Duck/Hong Kong/p46/97) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白

PGK2重組人 Phosphoglycerate Kinase 2 / PGK2 蛋白 Protein

大鼠關(guān)節(jié)囊成纖維細(xì)胞大鼠白細(xì)胞介素18(IL-18)試劑盒 ，英文名： IL-18 ELISA Kit

Mouse macrophage inflammatory protein 5 (MIP-5) ELISA Kit 小鼠巨噬細(xì)胞性蛋白5(MIP-5)試劑盒

MouseLebtospiraIgGELISAKit 小鼠鉤端IgG(Lebtospira)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforHumanNOD-likereceptor9,NLRELISAKit人NOD樣受體

同位素真菌/酵母細(xì)胞蛋白核酸結(jié)合凝膠遷移電泳分析試劑盒20次

ELISAKitsLR大鼠可溶性瘦素受體

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：

　　一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

　　1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；

　　2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；

　　3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；

　　4、 胎牛血清濃度為10%-80%

　　5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；

　　6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂浮；

　　7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；

　　8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

　　二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

　　1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；

　　2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；

　　3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；

　　4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；

　　5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；

　　6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行