服務(wù)熱線
021-59989018
歡迎訪問(wèn)上海研生實(shí)業(yè)有限公司網(wǎng)站
產(chǎn)品簡(jiǎn)介:
產(chǎn)品型號(hào):
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問(wèn)量:1228
更新時(shí)間:2024-11-05
大鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
腸系膜 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | YS-01X8223 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮分離自腸系膜動(dòng)脈組織;腸道指的是從胃幽門至門的消化管。腸是消化管中最長(zhǎng)的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過(guò)直腸經(jīng)門排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。腸系膜動(dòng)脈由背大動(dòng)脈發(fā)出的走行在腸系膜內(nèi),分布于消化管的動(dòng)脈。分成腸系膜上動(dòng)脈和腸系膜下動(dòng)脈。前者主要分布于小腸左側(cè),后者分布于結(jié)腸、大腸、泄殖腔等處。內(nèi)皮細(xì)胞或血管內(nèi)皮是一薄層的專門上皮細(xì)胞,由一層扁平細(xì)胞所組成。它形成血管的內(nèi)壁,是血管管腔內(nèi)血液及其他血管壁(單層鱗狀上皮)的接口。內(nèi)皮細(xì)胞是沿著整個(gè)循環(huán)系統(tǒng),由心臟直至最小的微血管。
方法簡(jiǎn)介:
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基:含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性:貼壁
細(xì)胞形態(tài):內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性:可傳2-3代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
大鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長(zhǎng)培養(yǎng)基及正確的操作方法來(lái)培養(yǎng),以此保證該細(xì)胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素16(IL-16)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素3(IL-3)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素4(IL-4)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠白介素-5(IL-5)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠黃體生成素(LH)試劑盒 96T/48T
Rat lymphocyte factor ELISA Kit 大鼠淋巴細(xì)胞因子試劑盒
humancoicoopieleasinghormone,CRHELISAKit 人促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanaimousaibody,HAMAELISA人抗鼠抗體(HAMA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物羥賴(HYL)含量比色法定量試劑盒20次
Humanurinaryfreecoisol,UFCELISAKit人尿游離(UFC)試劑盒規(guī)格:96T/48T
WD重復(fù)蛋白77抗體
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白28A抗體
VEGFC重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標(biāo)簽) Protein
FasL(抗原 0.5mgFasL(抗原)
IL24重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白 Protein
ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
ACHE Protein Mouse 重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白
FasL(抗原 0.5mgFasL(抗原)
ERBB4 Protein Human 重組人 / 恒河猴 HER4 / ErbB4 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
VEGFC重組大鼠 VEGFC / VEGF-C 蛋白 (aa 108-223, Fc 標(biāo)簽) Protein
ACHE Protein Mouse 重組小鼠 Acetylcholinesterase / ACHE 蛋白
IL24重組人 IL-24 / MDA-7 蛋白 Protein
大鼠腸系膜上動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞大鼠半乳糖凝集素3(Galectin3)試劑盒 ,英文名: Galectin3 ELISA Kit
Mouse ierferon beta (IFN- beta /IFNB) ELISA Kit 小鼠β干擾素(IFN-β/IFNB)試劑盒
ELISA 小鼠纖維連結(jié)蛋白(mous FN) 進(jìn)口分裝
CLIAKitforISR-Beta(MouseInsulieceptorBeta)ELISAKit小鼠胰島素受體β
通用型丁酰酯酶活性比色法定量試劑盒20次
AIL-R1大鼠腫瘤壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體1
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行