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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱:

大鼠骨外膜細(xì)胞

產(chǎn)品簡(jiǎn)介:

大鼠骨外膜細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品:GR6蛋白抗體 磷酸化KB抑制蛋白β抗體 E3泛素連接酶蛋白NEURL1B抗體 大鼠海馬神經(jīng)元細(xì)胞 小鼠心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞 GL-261+luc小鼠膠質(zhì)細(xì)胞瘤熒光素酶標(biāo)記 C643 (人甲狀腺癌細(xì)胞)

產(chǎn)品型號(hào):

廠商性質(zhì):經(jīng)銷商

訪問量:54

更新時(shí)間:2024-10-29

產(chǎn)品特性Product characteristics

大鼠骨外膜細(xì)胞

大鼠骨外膜細(xì)胞

商品屬性:

組織來源

產(chǎn)品規(guī)格

細(xì)胞形態(tài)

貨號(hào)

骨組織

5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶

成纖維細(xì)胞樣

YS-01X7632

細(xì)胞簡(jiǎn)介:

大鼠骨外膜分離自骨外膜組織;骨外膜是指成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜;在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細(xì)胞,稱為成骨細(xì)胞,這種細(xì)胞具有使骨骼生長(zhǎng)的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細(xì)胞的細(xì)胞,稱為破骨細(xì)胞。這兩種細(xì)胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細(xì)胞像建筑工人,不停地生成新的骨組織,破骨細(xì)胞則像維修工人,不停地清除老化、死亡、破碎的骨結(jié)構(gòu),并且還負(fù)責(zé)拆除“違章建筑",就是除去不需要的多余的骨組織,從而使骨的整體結(jié)構(gòu)更符合生物力學(xué)的需要。正常情況下,兩種細(xì)胞之間處于動(dòng)態(tài)的平衡之中,完成骨的生長(zhǎng)發(fā)育的新陳代謝。骨折之后,成骨細(xì)胞首先啟動(dòng),從而促使新骨痂的生成,即骨折的愈合。但是,股痂只是恢復(fù)了骨的連續(xù)性,往往不符合生物力學(xué)的需要,改建塑形的過程則必須有破骨細(xì)胞的參與才能完成。

方法簡(jiǎn)介:

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨外膜采用膠原酶消化法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè):

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠骨外膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

培養(yǎng)信息:

培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 每2-3天換液一次

生長(zhǎng)特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO25%

大鼠骨外膜細(xì)胞

細(xì)胞傳代及凍存:

細(xì)胞傳代步驟細(xì)胞凍存步驟
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:

  ① 組織塊培養(yǎng)法

  組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。

 ?、?消化培養(yǎng)法

 ?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

  對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

  ④器官培養(yǎng)

  器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

大鼠骨外膜細(xì)胞


公司正在出售的產(chǎn)品:

質(zhì)粒大量提取試劑盒(非柱式法)   5T

QSPlasmidMaxiKit   10T

血液(溶液型)   10ml(血量)

Relax-ISOBloodDNAKitI   50ml(血量)

豬α干擾素(IFN-α)ELISA 試劑盒

Human ai murine typhus aibody (ai-typhus-Ab) ELISA Kit 人抗斑疹傷寒抗體(ai-typhus-Ab)試劑盒

Porcineierleukin8,IL-8ELISAKit 豬白介素8(IL-8/CXCL8)試劑盒 進(jìn)口分裝

CLIAKitforAgIa(HumanangiotensinIIreceptoypeIa)ELISAKit人血管緊張素Ⅱ受體Ⅰa

血液牛病毒性腹瀉病毒I(BovineViralDiarrhoeaVirus-1;BVDV-1)定性試劑盒20

MouseypsinELISAKit小鼠(ypsin)試劑盒

AF680標(biāo)記的腺苷A2b受體/神經(jīng)生長(zhǎng)因子1受體抗體

二?;视王;D(zhuǎn)移酶2樣蛋白3抗體

VCAM1重組人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

雄激素受體(AR)重組蛋白 Recombinant Androgen Receptor (AR)

IL23重組人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AGT Protein Human 重組人 Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 蛋白 (His 標(biāo)簽)

Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 367-606, Fc 標(biāo)簽)

雄激素受體(AR)重組蛋白 Recombinant Androgen Receptor (AR)

AGT Protein Human 重組人 Angiotensinogen / SerpinA8 / AGT 蛋白 (His 標(biāo)簽)

VCAM1重組人 VCAM-1 / CD106 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Spike Protein MERS-CoV 中東呼吸綜合征 MERS-CoV (HCoV-EMC/2012) Spike Protein fragment (aa 367-606, Fc 標(biāo)簽)

IL23重組人 IL23A & 小鼠 IL12B Heterodimer 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

大鼠骨外膜細(xì)胞小鼠解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA 試劑盒

Rat ai cardiolipin aibody IgG (ACA-IgG) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗體IgG(ACA-IgG)試劑盒

HumanovalbuminspecificIgE,OVAsIgEELISAKit 人卵清蛋白特異性IgE(OVAsIgE)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanai-BullousPemphigoid180aibody,BP180-Ab試劑盒人抗BP180抗體(BP180-Ab)試劑盒

植物核糖體分離試劑盒10

Humanα-L-iduronidase,IDUAELISAKit人αL艾杜糖苷酸酶(IDUA)試劑盒

原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:

  一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)

  1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;

  2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;

  3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);

  4、 胎牛血清濃度為10%-80%

  5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);

  6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;

  7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;

  8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。

  二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)

  1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;

  2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;

  3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);

  4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);

  5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;

  6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。


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