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更新時(shí)間:2024-10-29
大鼠肌腱干細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
肌腱組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7505 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠肌腱干分離自肌腱組織;肌腱是肌腹兩端的索狀或膜狀致密結(jié)締組織,便于肌肉附著和固定。一塊肌肉的肌腱分附在兩塊或兩塊以上的不同骨上,是由于肌腱的牽引作用才能使肌肉的收縮帶動(dòng)不同骨的運(yùn)動(dòng)。每一塊骨骼肌都分成肌腹和肌腱兩部分,肌腹由肌纖維構(gòu)成,色紅質(zhì)軟,有收縮能力,肌腱由致密結(jié)締組織構(gòu)成,色乳白較硬,沒(méi)有收縮能力。肌腱把骨骼肌附著于骨骼。長(zhǎng)肌的肌腱多呈圓索狀,闊肌的肌腱闊而薄,呈膜狀,又叫腱膜。此處的肌腹即為通常所說(shuō)的紅肌,而肌腱即為白肌,分別控制肌肉的力量、爆發(fā)力和耐力。肌腱干細(xì)胞(TSCs)是一種來(lái)源于肌腱組織的間充質(zhì)干細(xì)胞,其具有多向分化潛能,并且在外源性前列腺素E2作用下異常分化。體外培養(yǎng)時(shí)該細(xì)胞群具有克隆形成能力、自我更新及多向分化潛能等干細(xì)胞的普遍特性。肌腱干細(xì)胞可以被誘導(dǎo)向脂肪細(xì)胞、軟骨樣細(xì)胞、骨細(xì)胞分化;在裸鼠模型中,肌腱干細(xì)胞還可以形成肌腱樣組織,軟骨樣組織以及腱-骨連接樣組織等。相比骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞而言,TSCs具有更好的克隆形成能力和增殖能力,軟骨相關(guān)基因和肌腱相關(guān)基因表達(dá)更高,具有更好的成骨、成脂和成軟骨能力,因此可以作為組織工程中的種子細(xì)胞。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肌腱干采用膠原酶、混合消化法并通過(guò)肌腱干細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠肌腱干經(jīng)CD44免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
人組胺(HIS)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人抵抗素(Resistin)ELISAKIT ELISA. 96T/48T
人骨特異性堿性0酸酶B(ALP-B)ELISAKit ELISA. 96T/48T
人骨鈣素/骨谷酸蛋白(OT/BGP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
豚鼠環(huán)0酸鳥(niǎo)苷(cGMP)試劑盒 ,英文名: cGMP ELISA Kit
Human hepatitis D virus IgG (HDV IgG) ELISA Kit 人丁型肝IgG(HDV IgG)試劑盒
MonkeyapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 猴載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforbFGF-4ELISAKit大鼠堿性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子4
細(xì)菌色酶比色法定量試劑盒20次
RabbitIerleukin17,IL-17ELISAKit兔白介素17(IL-17)試劑盒規(guī)格:96T/48T
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體
宮頸癌抑癌蛋白5/鋅指蛋白434抗體
B18R重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白 Protein
TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2 0.5mgTIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原)
TIGIT重組人 TIGIT / VSTM3 蛋白 Protein
IL20RA Protein Human 重組人 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽)
MAPK14 Protein Human 重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白
TIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2 0.5mgTIMP-2(Tissue Inhibitor of Metalloproteinase-2) 金屬蛋白酶組織抑制因子-2(抗原)
IL20RA Protein Human 重組人 IL20RA / IL-20RA 蛋白 (ECD, Fc 標(biāo)簽)
B18R重組牛痘病毒 B18R / B19R 蛋白 Protein
MAPK14 Protein Human 重組人 p38 alpha / MAPK14 蛋白
TIGIT重組人 TIGIT / VSTM3 蛋白 Protein
大鼠肌腱干細(xì)胞小鼠β內(nèi)啡肽受體(β-EPR)ELISA 試劑盒
Human vitamin B6 (VB6) ELISA Kit 人B6(VB6)試劑盒
HumanCollagenaseTypeIIELISAKit 人膠原酶II(CollagenaseII)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanc-fos試劑盒人c-fos試劑盒規(guī)格:96T/48T
轉(zhuǎn)基因玉米MON863品系基因定量試劑盒20次
Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit人絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
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