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更新時(shí)間:2024-10-29
本網(wǎng)站銷(xiāo)售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:大鼠卵泡膜細(xì)胞
組織來(lái)源:卵巢組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠卵泡膜分離自卵巢組織;卵巢是雌性動(dòng)物的生殖器官,卵巢的功能是產(chǎn)生卵以及類(lèi)固醇激素。卵巢的位置與睪丸相同,僅左側(cè)發(fā)育(右側(cè)已退化),呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān)。大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,但是部分魚(yú)類(lèi)的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),而所有鳥(niǎo)類(lèi)只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。卵巢的內(nèi)部結(jié)構(gòu)可分為皮質(zhì)和髓質(zhì)。皮質(zhì)位于卵巢的周?chē)糠?,主要由卵泡和結(jié)締組織構(gòu)成;髓質(zhì)位于中央,由疏松結(jié)締組織構(gòu)成,其中有許多血管、淋巴管和神經(jīng)。哺乳動(dòng)物的卵巢內(nèi)卵泡的發(fā)育需要相關(guān)激素的調(diào)節(jié)才能完成,垂體(卵泡刺激素和黃體生成素)使原始卵泡開(kāi)始發(fā)育,其過(guò)程中還產(chǎn)生大量的雌激素。雌激素是卵巢的顆粒細(xì)胞和卵泡膜細(xì)胞在垂體的作用下協(xié)同合成的,卵泡膜細(xì)胞合成的雄激素透過(guò)基膜進(jìn)入顆粒細(xì)胞,并轉(zhuǎn)變?yōu)榇萍に?。因此,卵泡膜?xì)胞在生殖內(nèi)分泌調(diào)節(jié)中占有關(guān)鍵的位置,了解其在病理及生理中的作用,對(duì)于與性激素有關(guān)的婦產(chǎn)科疾?。ㄈ缍嗄衣殉簿C合癥、卵巢癌等)的研究有著重要意義。在哺乳動(dòng)物卵泡生長(zhǎng)發(fā)育的過(guò)程中,卵母細(xì)胞由不斷增加的顆粒細(xì)胞層包裹。卵巢組織中的膜細(xì)胞作為卵泡的外層細(xì)胞可以維持卵泡結(jié)構(gòu)的完整性,參與構(gòu)成卵母細(xì)胞和顆粒細(xì)胞發(fā)育的微環(huán)境且為類(lèi)固醇激素的生成提供底物。在哺乳動(dòng)物中調(diào)節(jié)膜細(xì)胞類(lèi)固醇激素生成的機(jī)制已見(jiàn)相關(guān)報(bào)道,但是有關(guān)卵泡膜細(xì)胞的聚集、生長(zhǎng)和分化的研究尚不深入。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡膜采用膠原酶消化法制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠卵泡膜經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復(fù)蘇細(xì)胞:將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)⒓?xì)胞懸液加入6cm皿中),培養(yǎng)過(guò)夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
二、細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a)、對(duì)于貼壁細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細(xì)胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)液,將細(xì)胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對(duì)于懸浮細(xì)胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細(xì)胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補(bǔ)加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細(xì)胞懸起,將細(xì)胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
收到細(xì)胞如何處理?
1、首先,觀察細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請(qǐng)拍照,并及時(shí)與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。因運(yùn)輸問(wèn)題,部分貼壁細(xì)胞會(huì)有少量從瓶壁脫落;先不要打開(kāi)培養(yǎng)瓶蓋,將細(xì)胞置于細(xì)胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時(shí),以便穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說(shuō)明書(shū),了解細(xì)胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、所用基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細(xì)胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務(wù)依據(jù));建議細(xì)胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)。
5、貼壁細(xì)胞:若細(xì)胞生長(zhǎng)密度超過(guò)80%,可正常傳代;若未超過(guò)80%,移除細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng)基,預(yù)留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右再進(jìn)行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細(xì)胞:將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無(wú)菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細(xì)胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時(shí),若細(xì)胞密度超過(guò)80%,可將細(xì)胞懸液分至2個(gè)細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)培養(yǎng),補(bǔ)加培養(yǎng)基至5ml;若細(xì)胞密度未超過(guò)80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)80%左右時(shí)再進(jìn)行傳代操作
公司正在出售的產(chǎn)品:
中文名稱 方法 規(guī)格
人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISAKit ELISA.
人胰島素原(PI)ELISAKit ELISA.
人胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit ELISA.
豬白介素6(IL-6)ELISA 試劑盒
Human ai EB virus aibody (EBV) ELISA Kit 人抗EB病毒抗體(EBV)試劑盒
Porcineplasminogenactivatorinhibitor,PAIELISAKit 豬纖溶酶原激活物抑制因子(PAI)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforALDELISAKit大鼠固同
血液逆轉(zhuǎn)錄酶(REVERSEANSCREPTASE)活性熒光定量試劑盒20次
MouseVascuolarcelladhesionmolecule1,VCAM-1ELISAKit小鼠血管內(nèi)皮細(xì)胞粘附分子1(VCAM-1/CD106)試劑盒
HRAS1抗體
激活素受體相互作用蛋白1抗體
DPP7重組人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3)
MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 , Biotinylated Protein
AKT1 Protein Human 重組人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 標(biāo)簽)
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
趨化因子C-C-基元受體3(CCR3)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Receptor 3 (CCR3)
AKT1 Protein Human 重組人 AKT1 / PKB / PKBα 蛋白 (His 標(biāo)簽)
DPP7重組人 DPP7 / DPPII / DPP2 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
HA Protein H3N2 重組甲型流感 H3N2 (A/Perth/16/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 標(biāo)簽)
MSLN重組人 MSLN / Mesothelin 蛋白 , Biotinylated Protein
大鼠卵泡膜細(xì)胞豚鼠降鈣素基因相關(guān)肽(CGRP)ELISA 試劑盒
Rat androstene two ketone (ASD) ELISA Kit 大鼠雄(ASD)試劑盒
Humanβ2-Glycoprotein1aibodyIgA,β2-GP1AbIgAELISAKit 人β2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1AbIgA)試劑盒 進(jìn)口分裝
HumanCXC-chemokinereceptor1,CXCR1試劑盒人CXC趨化因子受體1(CXCR1)試劑盒
組織ERK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
HumanprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit人Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)試劑盒