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更新時(shí)間:2024-10-29
大鼠支氣管上皮細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
支氣管組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7032 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠支氣管上皮分離自支氣管組織;支氣管(Bronchi),是指由氣管分出的各級(jí)分枝,由氣管分出的一級(jí)支氣管,即左、右主支氣管。左主支氣管與右主支氣管相比較,前者較細(xì)長(zhǎng),走向傾斜;后者較粗短,走向較前者略直,所以經(jīng)氣管墮入的異物多進(jìn)入右主支氣管。支氣管和氣管還有以區(qū)別就是,氣管是以“C"型的氣管軟骨為支架,而支氣管不是。支氣管上皮是氣道與外界環(huán)境接觸的道防線,不僅是各種病原體、炎癥介質(zhì)作用的靶細(xì)胞,還作為效應(yīng)細(xì)胞合成、釋放多種炎性介質(zhì)和細(xì)胞因子,從而參與氣道炎癥及免疫反應(yīng)。支氣管上皮細(xì)胞在哮喘、慢性阻塞性肺疾病、肺癌、肺囊性纖維化以及一些感染性呼吸道疾病的發(fā)病機(jī)制中均起著重要的作用。體外培養(yǎng)的原代支氣管上皮細(xì)胞因與體內(nèi)組織在形態(tài)結(jié)構(gòu)和功能活動(dòng)上存在很大的相似性,因此,在基礎(chǔ)及臨床研究中極為重要。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮采用-混合消化法結(jié)合機(jī)械刮刷并通過(guò)上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠支氣管上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠可溶性細(xì)胞間粘附分子-1 英文名稱: Soluble Iercellular Adhesion Molecule-1 規(guī)格: 英文縮寫: sICAM-1
小鼠干擾素-α 英文名稱: Ierferon α 規(guī)格: 英文縮寫: IFN-α
小鼠干擾素-β 英文名稱: Ierferon β 規(guī)格: 英文縮寫: IFN-β
小鼠干擾素-γ 英文名稱: Ierferon γ 規(guī)格: 英文縮寫: IFN-γ
小鼠牛血清白蛋白(BSA)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat methylase ELISA Kit (Methylase) 大鼠甲基化酶(Methylase)試劑盒
Humandynamin2,DNM2ELISAKit 人發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Human11-dehydro-thromboxaneB2,11-DH-TXB2試劑盒人11去氫血栓烷B2(11-DH-TXB2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
真菌/酵母細(xì)胞線粒體分離(活性)試劑盒10次
MouseAquaporin4,AQP-4ELISAKit小鼠水通道蛋白4(AQP-4)試劑盒規(guī)格:96T/48T
金屬還原酶硬脂酸4抗體
線粒體核糖核酸酶P蛋白3抗體
NTRK3重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein
CD177/NB1 peptide 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原 0.5mgCD177/NB1 peptide 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原
AK1重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 Protein
CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 蛋白
CD274 Protein Rat 重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白
CD177/NB1 peptide 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原 0.5mgCD177/NB1 peptide 嗜中性粒細(xì)胞抗原CD177抗原
CSF3R Protein Human 重組人 G-CSFR / CD114 蛋白
NTRK3重組小鼠 TrkC / NTRK3 蛋白 Protein
CD274 Protein Rat 重組大鼠 PD-L1 / B7-H1 / CD274 蛋白
AK1重組人 AK1 / Adenylate kinase 1 蛋白 Protein
大鼠支氣管上皮細(xì)胞大鼠脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)試劑盒 ,英文名: ADIPOR1 ELISA Kit
Mouse soluble endothelial protein C receptor (sEPCR) ELISA Kit 小鼠可溶性血管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白C受體(sEPCR)試劑盒
Mouseglucoprotein130,gp130ELISAKIT 小鼠糖蛋白130(gp130)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體
B3高效液相色譜法定量試劑盒20次
ELISAKitCollagenaseI大鼠膠原酶I
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