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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:64
更新時間:2024-10-30
本網(wǎng)站銷售的化學產(chǎn)品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
產(chǎn)品名稱:人骨骼肌細胞
組織來源:骨骼肌組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 成纖維細胞樣
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
人骨骼肌分離自四肢肌肉組織;骨骼肌又稱橫紋肌,肌肉中的一種,約占全身重量的40%。骨骼肌纖維為長柱形的多核細胞,肌膜的外面有基膜緊密貼附。屬于橫紋肌,橫紋肌還包括心肌與內(nèi)臟橫紋肌,其中骨骼肌主要分布于四肢。每塊肌肉都是具有一定形態(tài)、結(jié)構(gòu)和功能的器官,有豐富的血管、淋巴分布,在軀體神經(jīng)支配下收縮或舒張,進行隨意運動。肌肉可根據(jù)共形狀、大小、位置、起止點、纖維方向和作用等命名。依形態(tài)命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨狀肌等。骨骼肌細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方。肌細胞內(nèi)有許多沿細胞長軸平行排列的細絲狀肌原纖維。每一肌原纖維都有相間排列的明帶(Ⅰ帶)及暗帶(A帶)。明帶染色較淺,而暗帶染色較深。暗帶中間有一條較明亮的線稱H線。H線的中部有一M線。明帶中間,有一條較暗的線稱為Z線。兩個Z線之間的區(qū)段,叫做一個肌節(jié)。骨骼肌細胞也稱橫紋肌細胞,細胞呈纖維狀,不分支,有明顯橫紋,核很多,且都位于細胞膜下方,細胞多呈梭行,具有一定的方向性。骨骼肌細胞原代分離培養(yǎng)3天后,可見細胞貼壁伸展,細胞形態(tài)大小不一,呈梭形、不規(guī)則形、三角形或扇形,核卵圓形、居中;2周后細胞匯合,多數(shù)細胞伸展呈長梭形,胞漿豐富,有分枝狀突起,細胞平行排列成單層或部分區(qū)域多層重疊生長,高低起伏;細胞密度低時,常交織成網(wǎng)狀;密度高時,則排列為旋渦狀或柵欄狀。傳代后細胞生長較快,4-6天即可匯合,并保持上述形態(tài)學特征和生長特點。
方法簡介:
公司實驗室分離的人骨骼肌采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人骨骼肌經(jīng)α-Sarcometric actin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)步驟:
一、復蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍,加入5mL培養(yǎng)基混合均勻。在1000RPM條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加4-6mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜(或?qū)⒓毎麘乙杭尤?cm皿中),培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細胞密度。
二、細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
a)、對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
2. 加1-2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2min,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加5ml以上含10%血清的培養(yǎng)基終止消化。
3.輕輕吹打細胞,脫落后吸出,在1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
4. 按5-6ml/瓶補加培養(yǎng)液,將細胞懸液按1:2的比例分到新的含5-6 ml培養(yǎng)液的新皿中或者瓶中。
b)、對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心8-10分鐘,棄上清液,補加1-2ml培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或瓶中。
方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基新皿中或者瓶中。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠6前列腺素(6-K-PG)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠5羥色胺(5-HT)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠5核苷酸酶(5-)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠Ⅳ型膠原(ColⅣ)試劑盒 試劑盒 組裝/原裝
小鼠肝病毒抗體(HV-Ab)試劑盒
Human decay accelerating factor (DAF/CD55) ELISA Kit 人衰變加速因子(DAF/CD55)試劑盒
Humaissue-typePlasiminogenActilyse,t-PAELISAKit 人組織型纖溶酶原激活劑(t-PA)試劑盒 進口分裝
HumanAi-titinAibody,TTN試劑盒人抗肌聯(lián)蛋白抗體(TTN)試劑盒
植物氧化型(GSSG)濃度熒光定量試劑盒50次
Humanansforminggrowthfactorα,TGF-αELISAKit人轉(zhuǎn)化生長因子α(TGF-α)試劑盒
驅(qū)動蛋白家族成員C2抗體
轉(zhuǎn)錄中介因子Tif1γ抗體
FCGR4重組小鼠 CD16-2 / FCGR4 蛋白 (His & AVI 標簽), Biotinylated Protein
ADAMTS7 peptide 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原 0.5mgADAMTS7 peptide 整合素樣金屬蛋白酶與1型-7抗原
WWP2重組人 WWP2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標簽)
EPCAM Protein Rat 重組大鼠 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白 (His 標簽)
促腎上皮質(zhì)激素釋放激素(CRH)重組蛋白 Recombinant Corticotropin Releasing Hormone (CRH)
FCGR2A Protein Human 重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (167 His, His 標簽)
MAPK1重組小鼠 ERK2 / MAPK1 / MAPK2 蛋白 (His & GST 標簽) Protein
TNFRSF14 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 HVEM / TNFRSF14 蛋白
GUCA1A重組人 GCAP1 / GUCA1A 蛋白 Protein
人骨骼肌細胞大鼠血管細胞粘附分子1(VCAM1)試劑盒 ,英文名: VCAM1 ELISA Kit
Mouse Glucose depende insulinoopic polypeptide (GIP) ELISA Kit 小鼠葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒
Mousetissueinhibitorsofmetalloproteinase2,TIMP-2ELISAkit 小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforHumanCampylobacterJejuniPEB1ELISAKit人空腸彎曲菌黏附蛋白
細胞CSF1R激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitDA大鼠多巴胺
收到細胞如何處理?
1、首先,觀察細胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象。若有,請拍照,并及時與技術(shù)支持聯(lián)系(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù))。
2、用75%酒精擦拭細胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細胞狀態(tài)。因運輸問題,部分貼壁細胞會有少量從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶蓋,將細胞置于細胞培養(yǎng)箱內(nèi)靜置培養(yǎng)2-4小時,以便穩(wěn)定細胞狀態(tài)。
3、仔細閱讀細胞說明書,了解細胞相關(guān)信息,如貼壁特性(貼壁/懸?。?、細胞形態(tài)、所用基礎培養(yǎng)基、血清比例、所需細胞因子、傳代比例、換液頻率等。
4、靜置完成后,取出細胞培養(yǎng)瓶,鏡檢、拍照,記錄細胞狀態(tài)(所拍照片將作為后續(xù)服務依據(jù));建議細胞傳代培養(yǎng)后,定期拍照、記錄細胞生長狀態(tài)。
5、貼壁細胞:若細胞生長密度超過80%,可正常傳代;若未超過80%,移除細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng)基,預留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右再進行傳代操作,瓶蓋可稍微擰松。
6、懸浮細胞:將細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)液體全部轉(zhuǎn)移至50ml無菌離心管內(nèi),1200rpm離心5min,離心后上清培養(yǎng)基可收集備用,管底細胞沉淀加入5ml培養(yǎng)基吹打、重懸。鏡檢時,若細胞密度超過80%,可將細胞懸液分至2個細胞培養(yǎng)瓶內(nèi)培養(yǎng),補加培養(yǎng)基至5ml;若細胞密度未超過80%,將細胞懸液移至原瓶繼續(xù)培養(yǎng),直至細胞密度達80%左右時再進行傳代操作