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更新時(shí)間:2024-10-30
人膠質(zhì)瘤組織源細(xì)胞
商品屬性:
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
膠質(zhì)瘤組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7461 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
人膠質(zhì)瘤組織源分離自癌組織;癌(cancer)是指起源于上皮組織的惡性腫瘤,是惡性腫瘤中最常見(jiàn)的一類。相對(duì)應(yīng)的,起源于間葉組織的惡性腫瘤統(tǒng)稱為肉瘤。有少數(shù)惡性腫瘤不按上述原則命名,如腎母細(xì)胞瘤、惡性畸胎瘤等。一般人們所說(shuō)的“癌癥"習(xí)慣上泛指所有惡性腫瘤。癌癥具有細(xì)胞分化和增殖異常、生長(zhǎng)失去控制、浸潤(rùn)性和轉(zhuǎn)移性等生物學(xué)特征,其發(fā)生是一個(gè)多因子、多步驟的復(fù)雜過(guò)程,分為致癌、促癌、演進(jìn)三個(gè)過(guò)程,與吸煙、感染、職業(yè)暴露、環(huán)境污染、不合理膳食、遺傳因素密切相關(guān)。癌細(xì)胞,是一種變異的細(xì)胞,是產(chǎn)生癌癥的病源。癌細(xì)胞與正常細(xì)胞不同,有無(wú)限增殖、可轉(zhuǎn)化和易轉(zhuǎn)移三大特點(diǎn),能夠無(wú)限增殖并破壞正常的細(xì)胞組織。癌細(xì)胞除了分裂失控外(能進(jìn)行多極分裂),還會(huì)局部侵入周圍正常組織甚至經(jīng)由體內(nèi)循環(huán)系統(tǒng)或淋巴系統(tǒng)轉(zhuǎn)移到身體其他部分。分惡性和良性兩種。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí),應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗(yàn);
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí),淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長(zhǎng);
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介:
公司實(shí)驗(yàn)室分離的癌組織源采用膠原酶消化、經(jīng)Percoll離心純化制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè):
公司實(shí)驗(yàn)室分離的人膠質(zhì)瘤組織源經(jīng)檢測(cè),純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)最佳
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性,可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠FMS樣酪酸激酶3配體(Flt3L)試劑盒 96T/48T
小鼠FMS樣酪酸激酶3(Flt3)試劑盒 96T/48T
小鼠E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒 96T/48T
小鼠E鈣粘著蛋白/上皮性鈣黏附蛋白(E-Cad)試劑盒 96T/48T
小鼠骨保護(hù)素配體(OPGL)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human orexin / orexin B (OX-B) ELISA Kit 人食欲素/阿立新B(OX-B)試劑盒
Humanpancreatickininogenase,PKELISAKit 人(PK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
HumanAi-Saccharomycescerevisiaeaibody,ASCA試劑盒人抗釀酒酵母抗體(ASCA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物細(xì)胞周期S后期同步(SYNCHRONY)處理試劑盒10次
Humanypsinogen-2,y-ⅡELISAKit人原Ⅱ(y-Ⅱ)試劑盒規(guī)格:96T/48T
神經(jīng)膠質(zhì)生長(zhǎng)因子/神經(jīng)調(diào)節(jié)蛋白β抗體
5號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框54抗體
POSTN重組小鼠 Periostin / POSTN 蛋白 Protein
Beta-Amyloid (1-42 0.1mgBeta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)
XCL2重組人 XCL2 蛋白 Protein
FAP Protein Human 重組人 FAP / Seprase 蛋白
CDH5 Protein Rat 重組大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白
Beta-Amyloid (1-42 0.1mgBeta-Amyloid (1-42) β淀粉樣肽(1-42)
FAP Protein Human 重組人 FAP / Seprase 蛋白
POSTN重組小鼠 Periostin / POSTN 蛋白 Protein
CDH5 Protein Rat 重組大鼠 VE-Cadherin / CD144 / CDH5 蛋白
XCL2重組人 XCL2 蛋白 Protein
人膠質(zhì)瘤組織源細(xì)胞大鼠雄激素受體(AR)試劑盒 ,英文名: AR ELISA Kit
Mouse heat shock protein 20 (Hsp-20) ELISA Kit 小鼠熱休克蛋白20(Hsp-20)試劑盒
MouseTissuefactor,IFELISAKit 小鼠組織因子(TF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHumanai-typhusaibodyELISAKit人抗斑疹傷寒抗體
細(xì)胞ERK2激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitMCP-1/CCL2/MCAF大鼠單核細(xì)胞趨化蛋白1
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