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產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:62
更新時間:2024-10-30
人皮層神經(jīng)元細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腦組織 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 神經(jīng)元細胞樣 | YS-01X7385 |
細胞簡介:
人皮層神經(jīng)元分離自腦皮層組織;皮層神經(jīng)元細胞是構(gòu)成中樞神經(jīng)系統(tǒng)結(jié)構(gòu)和功能的基本單位。神經(jīng)元是具有長突觸(軸突)的細胞,它由細胞體和細胞突起構(gòu)成。在長的軸突上套有一層鞘,組成神經(jīng)纖維,它的末端的細小分支叫做神經(jīng)末梢。細胞體位于腦、脊髓和神經(jīng)節(jié)中,細胞突起可延伸至全身各器官和組織中。細胞體是細胞含核的部分,其形狀大小有很大差別,直徑約4-120微米。核大而圓,位于細胞中央,染色質(zhì)少,核仁明顯。細胞質(zhì)內(nèi)有斑塊狀的核外染色質(zhì),還有許多神經(jīng)元纖維。細胞突起是由細胞體延伸出來的細長部分,又可分為樹突和軸突。每個神經(jīng)元可以有一或多個樹突,可以接受刺激并將興奮傳入細胞體。每個神經(jīng)元只有一個軸突,可以把興奮從胞體傳送到另一個神經(jīng)元或其他組織,如肌肉或腺體。皮質(zhì)神經(jīng)元是大腦皮質(zhì)的主要組成細胞之一,是大腦進行功能活動調(diào)節(jié)的基本單位,參與動物多種中樞神經(jīng)系統(tǒng)疾病的病理過程。通過形態(tài)學(xué)觀察顯示神經(jīng)元從貼壁、伸出突起開始;突起逐漸增多,而后突起進一步增多并逐漸成網(wǎng),同時細胞胞體增大,周邊光暈明顯。10-12d細胞最為豐滿,隨后神經(jīng)元開始裂解,突起逐漸減少,細胞已退化變性,輪廓模糊,光暈消失,細胞變形。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人皮層神經(jīng)元采用消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人皮層神經(jīng)元經(jīng)β-Tubulin免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 神經(jīng)元細胞樣
傳代特性 屬于終末分化細胞;屬于不增殖細胞群
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠補體1抑制物抗體(C1INH)試劑盒 96T/48T
小鼠脫氫酶E1(PDHE1)試劑盒 96T/48T
小鼠激酶M2型同工酶(M2-PK)試劑盒 96T/48T
小鼠激酶(PK)試劑盒 96T/48T
小鼠甲基化酶(Methylase)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human killer cell lectin like receptor (KLR) ELISA Kit 人殺傷細胞凝集素樣受體(KLR)試劑盒
Humaecombinationactivatinggene2,RAG-2ELISAKit 人重組激活基因2(RAG-2)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanai-gliadinaibody,AGA試劑盒人抗麥膠蛋白/麥醇溶蛋白抗體(AGA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物賴(lysine)含量熒光定量試劑盒20次
HumanVitaminB12,VB12ELISAKit人B12(VB12)試劑盒規(guī)格:96T/48T
細胞維甲酸結(jié)合蛋白1抗體
FITM1蛋白抗體
COL4A3重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標簽) Protein
ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3 0.5mgENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原
CLEC3B重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白 Protein
ENTPD5 Protein Human 重組人 ENTPD5 蛋白
CES5A Protein Mouse 重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白
ENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3 0.5mgENPP3/CD203c(ectonucleotide pyrophosphatase/phosphodiesterase 3) ENPP3抗原
ENTPD5 Protein Human 重組人 ENTPD5 蛋白
COL4A3重組大鼠 COL4A3 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CES5A Protein Mouse 重組小鼠 CES5 / Carboxylesterase-5 蛋白
CLEC3B重組人 CLEC3B / Tetranectin 蛋白 Protein
人皮層神經(jīng)元細胞大鼠細胞絨毛蛋白(CVL)試劑盒 ,英文名: CVL ELISA Kit
Mouse kidney injury molecule 1 (Kim-1) ELISA Kit 小鼠腎損傷分子1(Kim-1)試劑盒
Mousecardiacanscriptionfactor-GATA4ELISAKit 小鼠心肌轉(zhuǎn)錄因子GATA4試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHsp-60ELISAKit大鼠熱休克蛋白60
細胞LYNB激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次
ELISAKitIL-1β大鼠白介素1β