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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:60
更新時間:2024-10-30
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
胎盤組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 梭形、多角形 | YS-01X7201 |
細(xì)胞簡介:
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層分離自胎盤組織;胎盤(placenta)是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官,由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育,依靠胎盤從母體取得營養(yǎng),而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素,是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代,胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合,以達(dá)到母子間物質(zhì)的交換,這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。絨毛膜是由滋養(yǎng)層和胚外中胚層的壁層構(gòu)成。胚泡植入子宮內(nèi)膜后,在胚泡表面形成許多絨毛樣的突起,以細(xì)胞滋養(yǎng)層為中軸,外裹合體滋養(yǎng)層,稱初級干絨毛。胚外中胚層長入初級干絨毛的中軸,使初級干絨毛變成了次級干絨毛。當(dāng)絨毛膜的胚外中胚層內(nèi)形成血管網(wǎng)和結(jié)締組織,并與胚體內(nèi)的血管相通時,次級干絨毛改稱三級干絨毛。三級干絨毛末端的細(xì)胞滋養(yǎng)層細(xì)胞形成細(xì)胞滋養(yǎng)層殼。隨著胚胎發(fā)育,叢密絨毛膜與基蛻膜共同構(gòu)成了胎盤,而平滑絨毛膜則和包蛻膜一起逐漸與壁蛻膜融合。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細(xì)胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落,漂浮;
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細(xì)胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行;
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進(jìn)行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細(xì)胞中要加入生長因子,白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清,以利細(xì)胞生長;
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進(jìn)行。
方法簡介:
公司實驗室分離的人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層采用-DNA酶聯(lián)合消化法結(jié)合密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層經(jīng)Cytokeratin-7免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳3代左右
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞傳代及凍存:
細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時,可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細(xì)胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細(xì)胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞,如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1α 英文名稱: somal-derived factor-1 a 規(guī)格: 英文縮寫: SDF-1α
小鼠基質(zhì)細(xì)胞衍生因子-1R 英文名稱: somal-derived factor-1 R 規(guī)格: 英文縮寫: SDF-1R
小鼠可溶性E-選擇素 英文名稱: soluble E-Selectin 規(guī)格: 英文縮寫: sE-Selectin/sCD62E
小鼠可溶性L-選擇素 英文名稱: soluble L-Selectin 規(guī)格: 英文縮寫: sL-Selectin/sCD62L
小鼠粒細(xì)胞集落刺激因子(G-CSF)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat ciliary neuroophic factor (CF) ELISA Kit 大鼠睫狀神經(jīng)營養(yǎng)因子(CF)試劑盒
Humanneuophilgelatinase-associatedlipocalin,NGALELISAKit 人中性粒細(xì)胞明膠酶相關(guān)脂質(zhì)運載蛋白(NGAL)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanadrenalcoexaibody,ACA試劑盒人腎上腺皮質(zhì)抗體(ACA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
植物DNA甲基轉(zhuǎn)移酶(MET)總活性酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
mouseadrencocoicoopichormone,ACTHELISAKit小鼠促腎上腺皮質(zhì)激素(ACTH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
周期素依賴激酶抑制劑/P27單克隆抗體
γ-5羧酸合成酶抗體
CD8A重組雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白 Protein
p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142 0.5mgp- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142)) 0酸化β-連環(huán)蛋白抗原
DOT1L重組人 DOT1L / KMT4 蛋白 Protein
DCBLD2 Protein Human 重組人 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 蛋白
ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白
p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142 0.5mgp- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142)) 0酸化β-連環(huán)蛋白抗原
DCBLD2 Protein Human 重組人 DCBLD2 / ESDN / CLCP1 蛋白
CD8A重組雪貂 CD8A / CD8 alpha chain 蛋白 Protein
ANGPT2 Protein Mouse 重組小鼠 Angiopoietin-2 / ANG2 / ANGPT2 蛋白
DOT1L重組人 DOT1L / KMT4 蛋白 Protein
人胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細(xì)胞大鼠生長分化因子1(GDF1)試劑盒 ,英文名: GDF1 ELISA Kit
Mouse pepsin (Pepsin) ELISA Kit 小鼠(Pepsin)試劑盒
RatVitaminE,VEELISAKit 大鼠(VE)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforHCBII(HumanCollagen-likeBioproteinII)ELISAKit人膠原蛋白Ⅱ
細(xì)胞WNV(WESTNILE)病毒定性試劑盒20次
UlexEuropaeusagglinin,UEAELISAKit荊豆凝集素(UEA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
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