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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
人外周血單個核細胞
產(chǎn)品簡介：
人外周血單個核細胞公司正在出售的產(chǎn)品：KIAA0427蛋白抗體 新朊蛋白抗體（C端） 環(huán)指蛋白192抗體 人胃癌組織成纖維細胞 人羊膜間充質(zhì)干細胞 SNU-1076人頭頸部鱗狀細胞癌細胞 NCI-H23 (人非小細胞肺癌細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：51
更新時間：2024-10-30
產(chǎn)品特性Product characteristics
人外周血單個核細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
外周血 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7487 |
細胞簡介：
人外周血單個核分離自外周血；外周血是除骨髓之外的血液，臨床上常用一些方法把骨髓中的造血干細胞釋放到血液中，再在從血液中提取分離得到造血干細胞，我們把這樣得到的干細胞稱為外周血干細胞，在二十一世紀初人類開始的生命方舟計劃中提出外周血這一新概念。外周血單個核細胞(PBMC)即外周血中具有單個核的細胞，包括淋巴細胞和單核細胞。目前，主要的分離方法是密度梯度離心法，因為血液中各有形成分的比重存在差異，因此得以分離出不同的細胞。
方法簡介：
公司實驗室分離的人外周血單個核采用取外周血、通過密度梯度離心法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的人外周血單個核經(jīng)過檢測，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖；不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠免疫細胞表面抗原分子CD8+ 英文名稱： Mouse Cluster of Differeiation 8+ 規(guī)格： 英文縮寫： CD8+
小鼠免疫細胞表面抗原分子8 英文名稱： Mouse Cluster Of Differeiation 8 規(guī)格： 英文縮寫： CD8+
小鼠1型膠原 英文名稱： Mouse Collagen Type 1 規(guī)格： 英文縮寫： C1
小鼠3型膠原 英文名稱： Mouse Collagen Type 3 規(guī)格： 英文縮寫： C3
小鼠去甲(NE)試劑盒 96T/48T
Human urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 人型纖溶酶原激活物受體(PLAUR/uPAR)試劑盒
Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒 96T/48T 進口分裝
GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4試劑盒豚鼠單核細胞趨化蛋白4(MCP-4/CCL13)試劑盒規(guī)格：96T/48T
真菌/酵母細胞可溶性總蛋白制備試劑盒20次
MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)試劑盒規(guī)格：96T/48T
轉(zhuǎn)錄因子7類似物2重組兔單克隆抗體
白細胞分化抗原CD207抗體
CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標簽) Protein
MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽) Protein
CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白
CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標簽)
MAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a 0.5mgMAG (Myelin associated glycoprotein; L-MAG;MAG-a ) 髓鞘相關(guān)糖蛋白(抗原)
CRIP2 Protein Human 重組人 CRIP2 蛋白
CD200重組食蟹猴 CD200 蛋白 (Fc 標簽) Protein
CAMK4 Protein Mouse 重組小鼠 CAMK4 / CaMKIV 蛋白 (His & GST 標簽)
FCGR3A重組人 CD16a / FCGR3A 蛋白 (176 Phe, His & AVI 標簽) Protein
人外周血單個核細胞大鼠神經(jīng)元衍生孤兒受體1(NOR1)試劑盒 ，英文名： NOR1 ELISA Kit
Mouse surface membrane immunoglobulin (SmIg) ELISA Kit 小鼠細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)試劑盒
Ratacetylcholine,ACHELISAKit 大鼠乙酰(Ach)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforHBsAb(Humanai-hepatitisBvirussurfaceaibody)ELISAKit人抗乙型肝病毒表面抗體
細胞艾滋病毒1蛋白酶(HIV-1PROTEASE)活性熒光淬滅法定量試劑盒20次
SheepIerleukin1β,IL-1βELISAKit綿羊白介素1β(IL-1β)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
