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廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
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更新時間:2024-11-04
兔前列腺上皮細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
前列腺 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X8186 |
細胞簡介:
兔前列腺上皮分離自前列腺組織;前列腺(Prostate)是雄性的性腺器官;前列腺是不成對的實質(zhì)性器宮,由腺組織和肌組織構(gòu)成。前列腺如栗子,底朝上,與膀胱相貼,尖朝下,抵泌尿生殖膈,前面貼恥骨聯(lián)合,后面依直腸。前列腺腺體的中間有尿道穿過,扼守著尿道上口,所以,前列腺有問題時,排尿首先受影響。前列腺是機體非常少有的,具有內(nèi)、外雙重分泌功能的性分泌腺。作為外分泌腺,前列腺每天分泌前列腺液,是構(gòu)成精液主要成分;作為內(nèi)分泌腺,前列腺分泌的激素稱為“前列腺素"。前列腺上皮細胞與前列腺的功能關(guān)系密切,上皮細胞的損傷是前列腺炎的主要病癥,重度的前列腺炎患者的前列腺液內(nèi)可檢測到脫落的上皮細胞,這是上皮細胞損傷的標志。炎癥發(fā)生時,與炎癥相關(guān)的一些炎癥因子可能發(fā)生變化。因此,體外培養(yǎng)前列腺上皮細胞是研究前列腺炎及前列腺上皮肉瘤等疾病的前提和基礎(chǔ)。前列腺主要特征如下:①前列腺結(jié)構(gòu)和功能活動均受雄性激素的調(diào)控;②基底細胞主要表達高分子量細胞角蛋白(CK-5、CK-14),基底上皮細胞可分化成管腔上皮細胞;③前列腺上皮細胞的培養(yǎng)為研究前列腺的許多重要特性以及化學(xué)和激素性致癌作用提供了機會。
方法簡介:
實驗室分離的兔前列腺上皮采用先消化、后膠原酶-聯(lián)合消化并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔前列腺上皮經(jīng)PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
包被條件:鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):上皮細胞樣
傳代特性:可傳1-2代
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
兔前列腺上皮體外培養(yǎng)周期有限;建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng),以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
酸性品紅(復(fù)紅) 5g
FuchsinAcid 25g
G-418抗菌素 1g
G-418Sulfate 5g
豚鼠轉(zhuǎn)化生長因子β3(TGFβ3)試劑盒 ,英文名: TGFβ3 ELISA Kit
Human pulmonary surfacta associated protein D (SP-D) ELISA Kit 人肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白D(SP-D)試劑盒
rabbithepatocytegrowthfactor,HGFELISAKit 兔子肝細胞生長因子(HGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBDNF(HumanBrainderivedneuroophicfacor)ELISAKit人腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子
細菌總巰基含量比色法定量試劑盒20次
Rabbitcyclicadenosinemonophosphate,cAMPELISAKit兔環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
苯丙羥化酶4單克隆抗體
錨定蛋白G抗體
APCS重組大鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein
HCV-NS1 丙型肝病毒-NS1(抗原 0.5mgHCV-NS1 丙型肝病毒-NS1(抗原)
PRSS3重組人 Trypsin-3 / PRSS3 蛋白 Protein
IFNW1 Protein Human 重組人 IFN omega 1 / IFNW1 蛋白
CD33 Protein Mouse 重組小鼠 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標簽)
HCV-NS1 丙型肝病毒-NS1(抗原 0.5mgHCV-NS1 丙型肝病毒-NS1(抗原)
IFNW1 Protein Human 重組人 IFN omega 1 / IFNW1 蛋白
APCS重組大鼠 Serum amyloid P component / APCS / SAP 蛋白 Protein
CD33 Protein Mouse 重組小鼠 CD33 / Siglec-3 蛋白 (Fc 標簽)
PRSS3重組人 Trypsin-3 / PRSS3 蛋白 Protein
兔前列腺上皮細胞大鼠巨噬細胞性蛋白相關(guān)蛋白1(MRP1)試劑盒 ,英文名: MRP1 ELISA Kit
Monkey platelet factor 4 (PF-4/CXCL4) ELISA Kit血小板因子4(PF-4/CXCL4)試劑盒
Ratlymphotactin,Lptn/LTNELISAKit 大鼠淋巴細胞趨化因子(Lptn/LTN/XCL1)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforfractalkine/CX3CL1ELISAKit大鼠趨化因子
細胞活力臺盼藍染色試劑盒100次
RatPhosphorylatedadenosinemonophosphateactivatedproteinkinase,AMPKELISAKit大鼠0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行