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基礎信息Product information
產(chǎn)品名稱：
兔腎小管上皮細胞
產(chǎn)品簡介：
兔腎小管上皮細胞公司正在出售的產(chǎn)品：甲狀腺相關眼病自身抗原抗體 魚、青鳉魚卵黃蛋白原抗體 乳酸菌S-層蛋白抗體 兔輸卵管上皮細胞 人角膜成纖維細胞 NCI-H1993人非小細胞肺癌細胞 K-562 [K562] (人慢性髓原白血病細胞)
產(chǎn)品型號：
廠商性質：經(jīng)銷商
訪問量：65
更新時間：2024-11-04
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔腎小管上皮細胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
腎 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細胞樣 | YS-01X7953 |
細胞簡介：
兔腎小管上皮分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產(chǎn)物及某些廢物、毒物，同時經(jīng)重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎小管是機體腎臟器官上與腎小囊壁層相連的一條細長上皮性小管，具有重吸收（reabsorption）和排泌作用。腎小管按不同的形態(tài)結構、分布位置和功能分成近端小管、髓袢和遠端小管三部分；近端小管可分為直部和曲部，曲部也稱為近曲小管，位于皮質迷路內，于腎小體附近高度蟠曲；遠端小管曲部也稱為遠曲小管，位于皮質迷路內。腎小管上皮細胞是腎小管外面的一層細胞，腎小管上皮細胞的分離、培養(yǎng)是研究腎臟疾病的一項重要技術，目前該分離方法有酶分離法、化學分離法篩網(wǎng)分離法、顯微解剖分離法、流式細胞儀分離法等。腎小管上皮細胞主要功能：①腎小管上皮細胞重吸收原尿中幾乎全部的葡萄糖和氨基酸；②排泌非營養(yǎng)物質進入終尿；③細胞能分泌炎癥介質如細胞因子和趨化因子，通過產(chǎn)生IL-8或直接趨化白細胞參與急性炎癥反應；④移植腎炎癥和新月體腎炎中PTEpiC表達IL-2R和MHC-Ⅱ類抗原，這說明腎小管上皮細胞參與腎免疫損傷的發(fā)生。隨著對腎間質纖維化機制研究的日漸加深，腎小管上皮細胞（RTECs）在其中的作用日益被人們重視。因此，提供良好的腎小管上皮細胞模型，在腎小管間質疾病的發(fā)病機制和治療藥物篩選的研究中是非常重要的。
方法簡介：
實驗室分離的兔腎小管上皮采用先機械研磨過不銹鋼網(wǎng)篩分離得到腎小管、后用膠原酶消化，結合上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
實驗室分離的兔腎小管上皮經(jīng)Cytokeratin-18免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細胞形態(tài)：上皮細胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔腎小管上皮體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的專用生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細胞的優(yōu)良培養(yǎng)狀態(tài)。
細胞傳代及凍存：
| 細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
| 如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠促性腺素釋放素受體（GHR）試劑盒 96T/48T
小鼠釋放激素(GH)試劑盒 96T/48T
小鼠促生長激素釋放激素(GHRH)試劑盒 96T/48T
小鼠促上腺皮質激素(ACTH)試劑盒 96T/48T
小鼠降鈣素基因相關肽(CGRP)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat granzyme B (Gzms-B) ELISA Kit 大鼠顆粒酶B(Gzms-B)試劑盒
Humanhistatin5ELISAKit 人富組蛋白(histatin5)試劑盒 96T/48T 進口分裝
Humanaidiuretichormone/vasopressin/argininevasopressin,ADH/VP/AVP試劑盒人抗利尿激素/血管加壓素/精加壓素(ADH/VP/AVP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物脊髓過氧化酶(MPO)活性比色法定量試劑盒20次
HumanαLactalbumin，α-LaELISAKit人α乳清蛋白(α-La)試劑盒規(guī)格：96T/48T
1號染色體開放閱讀框53抗體
內臟異位相關蛋白/鋅指蛋白203抗體
CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 Protein
SRF(Serum response factor 0.5mgSRF(Serum response factor) 血清應答因子抗原
PRDX1重組人 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 Protein
EIF5A Protein Human 重組人 EIF5A 蛋白
S100A4 Protein Human 重組人 S100A4 蛋白 (Fc 標簽)
SRF(Serum response factor 0.5mgSRF(Serum response factor) 血清應答因子抗原
EIF5A Protein Human 重組人 EIF5A 蛋白
CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 Protein
S100A4 Protein Human 重組人 S100A4 蛋白 (Fc 標簽)
PRDX1重組人 Peroxiredoxin 1 / PRDX1 蛋白 Protein
兔腎小管上皮細胞大鼠解整合素金屬蛋白酶8(ADAM8)試劑盒 ，英文名： ADAM8 ELISA Kit
Mouse lipoprotein lipase (LPL) ELISA Kit 小鼠脂蛋白脂酶(LPL)試劑盒
Rathiston-H2bELISAKit 大鼠組蛋白H2b(histon-H2b)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforFlt3LELISAKit大鼠FMS樣酪激酶3配體
細胞基質金屬蛋白酶3H同位素標記試劑盒20次
RatParathyroidHormoneRelatedProtein,PTHrPELISAKit大鼠甲狀旁腺激素相關蛋白(PTHrP)試劑盒規(guī)格：96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應將原代細胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細胞中要加入生長因子，白血病細胞中要加入少量的原患者血清，以利細胞生長；
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行
