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更新時間:2024-11-04
小鼠脾淋巴細胞
商品屬性:
組織來源 | 產品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
脾臟 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 圓形 | YS-01X7474 |
細胞簡介:
小鼠脾淋巴分離自脾臟組織;脾臟是機體最大的免疫器官,占全身淋巴組織總量的25%,含有大量的淋巴細胞和巨噬細胞,是機體細胞免疫和體液免疫的中心。位于左季肋區(qū)后外方肋弓深處,與9-11肋相對,長軸與第10肋一致。膈面與膈肌和左肋膈竇相鄰,前方有胃,后方與左腎、左腎上腺毗鄰,下端與結腸脾溝相鄰,地柔軟的網(wǎng)狀內皮細胞器官。淋巴細胞(lymphocyte)白細胞的一種,由淋巴器官產生,機體免疫應答功能的重要細胞成分。淋巴器官根據(jù)其發(fā)生和功能的差異,可分為中樞淋巴器官(又名初級淋巴器官)和周圍淋巴器官(又名次級淋巴器官)兩類。前者包括胸腺、腔上囊或其相當器官(有人認為在哺乳動物是骨髓)。它們無須抗原刺激即可不斷增殖淋巴細胞,成熟后將其轉送至周圍淋巴器官。后者包括脾、淋巴結等。成熟淋巴細胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂?。?/p>
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經靜置培養(yǎng)1周時,應將細胞懸液經低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內,進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。
方法簡介:
公司實驗室分離的小鼠脾淋巴采用機械研磨法結合密度梯度離心法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測:
公司實驗室分離的小鼠脾淋巴經過檢測,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
② 消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
④器官培養(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。
公司正在出售的產品:
蔗糖合成酶(SS)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
蔗糖0酸合成酶(SPS)測試盒 可見分光光度法 50管/48樣
酸性轉化酶(AI)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
轉化酶(NI)測試盒 可見分光光度法 50管/24樣
植物果膠酶(Pectinase) 試劑盒
Human ai nucleosome aibody IgG (AnuA-IgG) ELISA Kit 人抗核小體抗體IgG(AnuA-IgG)試劑盒
PorcineapoproteinB100,apo-B100ELISAKit 豬載脂蛋白B100(apo-B100)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforAECAELISAKit大鼠抗內皮細胞抗體
血液氧化型(GSSG)濃度熒光定量試劑盒50次
MouseSomalcellderivedfactor1a,SDF-1aELISAKit小鼠基質細胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)試劑盒
KIAA1211蛋白抗體
EVX2蛋白抗體
CD200R1重組小鼠 CD200R1 / OX-2R 蛋白 (His 標簽) Protein
BAFF/CD257(B cell activating factor 0.5mgBAFF/CD257(B cell activating factor) TNF家族B細胞激活因子抗原
GM2A重組人 GM2A 蛋白 (His 標簽) Protein
ACP1 Protein Human 重組人 ACP1 / LMW-PTP 蛋白 (GST 標簽)
CD36 Protein Rat 重組大鼠 CD36 / SCARB3 蛋白
BAFF/CD257(B cell activating factor 0.5mgBAFF/CD257(B cell activating factor) TNF家族B細胞激活因子抗原
ACP1 Protein Human 重組人 ACP1 / LMW-PTP 蛋白 (GST 標簽)
CD200R1重組小鼠 CD200R1 / OX-2R 蛋白 (His 標簽) Protein
CD36 Protein Rat 重組大鼠 CD36 / SCARB3 蛋白
GM2A重組人 GM2A 蛋白 (His 標簽) Protein
小鼠脾淋巴細胞大鼠鈣結合蛋白(CALB)試劑盒 ,英文名: CALB ELISA Kit
Rat beta 2 glycoprotein 1 aibody IgA/G/M (beta 2-GP1 IgA/G 大鼠β2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G
RatFactor-relatedApoptosis,FASELISAKit 大鼠凋亡相關因子(FAS/CD95)試劑盒 進口分裝
CLIAKitforDP(Humandeoxyuridineiphate)ELISAKit人脫氧尿三0酸
細胞培養(yǎng)液低密度脂蛋白(LDL-Cholesterol)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
RatHya]uronatebindingprotein,HABPELISAKit大鼠透明質酸結合蛋白(HABP)試劑盒