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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱：
雞肺動脈平滑肌細(xì)胞
產(chǎn)品簡介：
雞肺動脈平滑肌細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：鋅指蛋白547抗體 1號染色體開放閱讀框73抗體 人脈絡(luò)膜血管內(nèi)皮細(xì)胞 磷酸化泛素連接酶NEDD4-2抗體 大鼠陰道平滑肌細(xì)胞 受體活性修飾蛋白2抗體 人牙齦成纖維細(xì)胞 NMDA受體調(diào)節(jié)1樣蛋白抗體
產(chǎn)品型號：
廠商性質(zhì)：經(jīng)銷商
訪問量：99
更新時間：2024-11-05
產(chǎn)品特性Product characteristics
雞肺動脈平滑肌細(xì)胞
商品屬性：
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號 |
肺動脈組織 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細(xì)胞樣 | YS-01X7010 |
細(xì)胞簡介：
雞肺動脈成纖維分離自肺動脈組織；肺動脈亦稱肺動脈干。在呼吸空氣的脊椎動物中，把靜脈血由心臟導(dǎo)向肺臟的動脈。肺大動脈起于右心室，在主動脈之前向左上后方斜行，在主動脈弓下方分為左、右肺動脈，經(jīng)肺門入肺。肺動脈干位于心包內(nèi)，為一粗短的動脈干。起自右心室，在升主動脈前方向左后上方斜行，至主動脈弓下方分為左、右肺動脈。左肺動脈較短，在左主支氣管前方橫行，分二支進入左肺上、下葉。右肺動脈較長而粗，經(jīng)升主動脈和上腔靜脈后方向右橫行，至右肺門處分為三支進入右肺上、中、下葉。成纖維細(xì)胞（Fibroblast）是疏松結(jié)締組織的主要細(xì)胞成分，由胚胎時期的間充質(zhì)細(xì)胞分化而來；成纖維細(xì)胞較大，輪廓清楚，多為突起的紡錘形或星形的扁平狀結(jié)構(gòu)，其細(xì)胞核呈規(guī)則的卵圓形，核仁大而明顯。成纖維細(xì)胞功能活動旺盛，細(xì)胞質(zhì)嗜弱堿性，具明顯的蛋白質(zhì)合成和分泌活動，在一定條件下，它可以實現(xiàn)跟纖維細(xì)胞的互相轉(zhuǎn)化；成纖維細(xì)胞對不同程度的細(xì)胞變性、壞死和組織缺損的修復(fù)有著十分重要的作用。剛分離的肺動脈成纖維細(xì)胞呈圓形、折光性良好，懸浮于培養(yǎng)基中。30min細(xì)胞貼壁，其中部分開始伸出偽足，表現(xiàn)為小的突起；6h后細(xì)胞基本貼壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布較均勻，散在生長，不聚集成團；細(xì)胞生長迅速，5-7天即呈融合狀態(tài)，細(xì)胞排列緊密，有的交叉重疊生長，平坦、胞體較大，細(xì)胞質(zhì)透明，細(xì)胞核較大，呈橢圓形，顏色淡。細(xì)胞融合，并彼此連接成網(wǎng)狀；細(xì)胞呈突起的紡錘形或星形的扁平分布。肺動脈成纖維細(xì)胞在生理條件下的主要功能包括：構(gòu)造和維持肺動脈的正常形態(tài)；合成和釋放細(xì)胞外基質(zhì)；組織損傷后及時大量聚集修復(fù)損傷組織。
方法簡介：
公司實驗室分離的雞肺動脈平滑肌采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
公司實驗室分離的雞肺動脈平滑肌經(jīng)α-SMA免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣
傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠骨成型蛋白7 英文名稱： Mouse Bone Morphogenetic Protein 7 規(guī)格： 英文縮寫： BMP7
小鼠B淋巴細(xì)胞刺激因子 英文名稱： B lymphocyte stimulator 規(guī)格： 英文縮寫： BAFF
小鼠凋亡因子BAX 英文名稱： apoptogen BAX 規(guī)格： 英文縮寫： BAX
小鼠細(xì)胞凋亡相關(guān)基因BCL-2 英文名稱： Cell appoptosis inhibitory BCL-2 規(guī)格： 英文縮寫： BCL-2
小鼠抗Ⅲ抗體(AT-Ⅲ)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human heat shock protein 40 (HSP-40) ELISA Kit 人熱休克蛋白40(HSP-40)試劑盒
HumanEuglobulinLysis,ELELISAKit 人優(yōu)球蛋白(EL)試劑盒 96T/48T 進口分裝
HumanAngiopoietin1,ANG-1試劑盒人血管生成素1(ANG-1)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物脯(proline)含量比色法定量試劑盒20次
LHELISAKit魚促黃體激素(LH)試劑盒規(guī)格：96T/48T
PE標(biāo)記小鼠CD5單克隆抗體
肌肉骨骼受體酪激酶抗體
THOP1重組小鼠 THOP1 蛋白 Protein
S100鈣結(jié)合蛋白(S100)重組蛋白 Recombinant S100 Calcium Binding Protein (S100)
KLRK1重組人 NKG2D / CD314 蛋白 (aa 78-216, His 標(biāo)簽) Protein
DSC2 Protein Human 重組人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白
EPCAM Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 EpCAM / TROP-1 / TACSTD1 蛋白
防御素β103B(DEFβ103B)重組蛋白 Recombinant Defensin Beta 103B (DEFB103B)
DSC2 Protein Human 重組人 DSC2 / Desmocollin-2 蛋白
FIGF重組小鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 Protein
IGFBP1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IGFBP1 蛋白
BIRC5重組人 Survivin / BIRC5 / API4 蛋白 Protein
雞肺動脈平滑肌細(xì)胞大鼠層連蛋白/板層素(LN)試劑盒 ，英文名： LN ELISA Kit
Mouse N- acetyl - seryl - aspayl -- lysyl - proline (AcSDK 小鼠N-乙?；?span>-絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯(AcSDK
ELISA 小鼠雙鏈DNA(mouse dsDNA) 進口分裝
CLIAKitforLC1(Humanai-livercytosolaibodytype1)ELISAKit人抗肝細(xì)胞胞質(zhì)1型抗體
通用型vero毒素大腸桿菌志賀氏毒素-1(VTEC-Shigatoxin1)試劑盒20次
ELISAKitBV猴B病毒
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂?。?/p>
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進行分瓶試驗；
4、長期培養(yǎng)時，淋巴細(xì)胞中要加入生長因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時才能進行
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