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基礎(chǔ)信息Product information
產(chǎn)品名稱(chēng)：
兔肝外膽管上皮細(xì)胞
產(chǎn)品簡(jiǎn)介：
兔肝外膽管上皮細(xì)胞公司正在出售的產(chǎn)品：核纖層蛋白相關(guān)蛋白1B抗體 胎盤(pán)蛋白20抗體 腫瘤抑制基因PEPE1抗體 兔骨細(xì)胞 人前列腺成纖維細(xì)胞 ONS-76人腦髓母細(xì)胞瘤細(xì)胞 THP-1 (人單核細(xì)胞白血病)
產(chǎn)品型號(hào)：
廠(chǎng)商性質(zhì)：經(jīng)銷(xiāo)商
訪(fǎng)問(wèn)量：59
更新時(shí)間：2024-10-31
產(chǎn)品特性Product characteristics
兔肝外膽管上皮細(xì)胞
商品屬性：
組織來(lái)源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細(xì)胞形態(tài) | 貨號(hào) |
膽管 | 5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶 | 上皮細(xì)胞樣 | YS-01X7983 |
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
兔肝外膽管上皮分離自肝外膽管組織；肝臟是身體內(nèi)以代謝功能為主的一個(gè)器官，并在身體里面起著去氧化、儲(chǔ)存肝糖、分泌性蛋白質(zhì)的合成等作用；肝臟也制造消化系統(tǒng)中之膽汁。肝臟是機(jī)體內(nèi)臟里最大的器官，位于機(jī)體中的腹部位置，在右側(cè)橫隔膜之下，位于膽囊之前端且于右邊腎臟的前方，胃的上方。肝臟是機(jī)體消化系統(tǒng)中最大的消化腺，為一紅棕色的V字形器官。肝臟是尿素合成的主要器官，又是新陳代謝的重要器官。肝臟在機(jī)體位置和形態(tài)結(jié)構(gòu)：肝臟位于右上腹，隱藏在右側(cè)膈下和肋骨深面，大部分肝為肋弓所復(fù)蓋，僅在腹上區(qū)、右肋弓間露出并直接接觸腹前壁，肝上面則與膈及腹前壁相接。臨床上常見(jiàn)的膽管病變?nèi)缒懙篱]鎖、先天性膽總管囊腫、原發(fā)性硬化性膽管炎等，都是以膽管上皮細(xì)胞為病變的靶位，引起膽管上皮的損傷。了解正常膽管上皮細(xì)胞的生物學(xué)特征和病變膽管上皮細(xì)胞的病理生理學(xué)特征對(duì)研究膽管病變的發(fā)病機(jī)制、診斷和治療具有重要意義。
原代細(xì)胞的培養(yǎng)條件：
一、靜置貼壁細(xì)胞(包括半貼壁細(xì)胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細(xì)胞要通過(guò)充分漂洗，以盡量除去消化液的毒性；
2、細(xì)胞接種時(shí)濃度要稍大一些，至少為5×108細(xì)胞/L；
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng)；
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng)；
6、在起始的2天中盡量減少振蕩，以防止剛貼壁的細(xì)胞發(fā)生脫落，漂??；
7、待細(xì)胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀，應(yīng)將原代細(xì)胞換液；
8、用骨髓或外周血中的懸浮細(xì)胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時(shí)，應(yīng)將細(xì)胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細(xì)胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時(shí)要盡量去除紅細(xì)胞；
2、短期培養(yǎng)，可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進(jìn)行；
3、細(xì)胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi)，進(jìn)行分瓶試驗(yàn)；
4、長(zhǎng)期培養(yǎng)時(shí)，淋巴細(xì)胞中要加入生長(zhǎng)因子，白血病細(xì)胞中要加入少量的原患者血清，以利細(xì)胞生長(zhǎng)；
5、細(xì)胞換液一般每隔3天需半量換液一次；
6、細(xì)胞傳代一般待細(xì)胞增殖加快、細(xì)胞密度較高時(shí)才能進(jìn)行。
方法簡(jiǎn)介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝外膽管上皮采用膠原酶灌注消化法后，再用膠原酶-DNA酶聯(lián)合消化，接種至預(yù)先包被鼠尾膠原的培養(yǎng)瓶中，通過(guò)上皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái)，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔肝外膽管上皮經(jīng)Cytokeratin-19免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息：
包被條件：鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）
培養(yǎng)基：含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：上皮細(xì)胞樣
傳代特性：可傳1-2代
消化液：0.25%
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
細(xì)胞傳代及凍存：
| 細(xì)胞傳代步驟 | 細(xì)胞凍存步驟 |
| 如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面T25瓶為例； 1．細(xì)胞凍存時(shí)，棄去培養(yǎng)基后，PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml，細(xì)胞變圓脫落后，加入2ml培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。 2．1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮，加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻，按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。本公司按每個(gè)凍存管細(xì)胞數(shù)目大于1X106個(gè)細(xì)胞凍存。3．將凍存管置于程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細(xì)胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種：
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡(jiǎn)便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長(zhǎng)。
?、?消化培養(yǎng)法
?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法
對(duì)于懸浮生長(zhǎng)的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無(wú)需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀(guān)察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品：
小鼠γ基(GABA)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠5羥色胺(5-HT)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠P物質(zhì)受體(SP-R)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠P物質(zhì)(SP)ELISAKit ELISA. 96T/48T
小鼠呼腸孤病毒3型抗體(RV-3 Ab)試劑盒 96T/48T
Rat phosphotylinosital 3 kinase (PI3K) ELISA Kit 大鼠0酸肌醇3激酶(PI3K)試劑盒
humanAzidothymidine,AZTELISAKit 人(AZT)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humanai-myelinassociatedglycoproteinaibody,MAGAb試劑盒人抗髓鞘相關(guān)糖蛋白抗體(MAGAb)試劑盒規(guī)格：96T/48T
植物染色質(zhì)免疫沉淀分析(CHIP)試劑盒10次
HumanUreaplasmaurealyticumaibody,UU-AbELISAKit人解脲脲原體抗體(UU-Ab)試劑盒規(guī)格：96T/48T
KLHDC9蛋白抗體
甲型流感病毒血凝素2抗體
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
Sema3F (semaphorin 3F 0.5mgSema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原
METAP1D重組人 MAP1D / Methionine Aminopeptidase 1D 蛋白 Protein
EVI2A Protein Human 重組人 EVI2A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
IL2RA Protein Human 重組人 IL2Ra / CD25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
Sema3F (semaphorin 3F 0.5mgSema3F (semaphorin 3F) 臂板蛋白3F抗原
EVI2A Protein Human 重組人 EVI2A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
HA重組甲型流感 H3N2 (A/Aichi/2/1968) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein
IL2RA Protein Human 重組人 IL2Ra / CD25 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
METAP1D重組人 MAP1D / Methionine Aminopeptidase 1D 蛋白 Protein
兔肝外膽管上皮細(xì)胞大鼠膜聯(lián)蛋白A2(ANXA2)試劑盒 ，英文名： ANXA2 ELISA Kit
Mouse insulin ELISA Kit (INS) 小鼠胰島素(INS)試劑盒
RatangiotensionⅠ,Ang-ⅠELISAKit 大鼠血管緊張素Ⅰ(Ang-Ⅰ)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforGFAP(Mouseglialfibrillaryacidicprotein)ELISAKit小鼠神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白
細(xì)胞甘油二脂酰激酶(DAGKINASE)酶連續(xù)循環(huán)比色法定量試劑盒20次
RatsolubleClusterofdiffereiation86,sCD86ELISAKit大鼠可溶性CD86(B7-2/sCD86)試劑盒規(guī)格：96T/48T
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