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產(chǎn)品簡介:
產(chǎn)品型號:
廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
訪問量:64
更新時間:2024-10-31
兔睪丸間質(zhì)細胞
商品屬性:
組織來源 | 產(chǎn)品規(guī)格 | 細胞形態(tài) | 貨號 |
睪丸 | 5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶 | 成纖維細胞樣 | YS-01X7879 |
細胞簡介:
兔睪丸間質(zhì)分離自睪丸組織;睪丸間質(zhì)細胞成群分布在曲精小管之間,胞體呈圓形,橢圓形或不規(guī)則形,胞體較大,直徑約20μm,胞質(zhì)呈嗜酸性,細胞核呈圓形或卵圓形,常位于中央,染色較淡,有1-2個核仁線粒體多,呈管嵴狀,無分泌顆粒。從青春期開始,睪丸間質(zhì)細胞受垂體前葉嗜堿性細胞分泌的間質(zhì)細胞刺激素(黃體生成素)的作用,能合成分泌雄性激素,可促進的發(fā)生和男性生殖器官發(fā)育,以及維持性征和性功能。
方法簡介:
實驗室分離的兔睪丸間質(zhì)采用膠原酶消化法制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
實驗室分離的兔睪丸間質(zhì)經(jīng)3β-HSD免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基:含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率:每2-3天換液一次
生長特性:貼壁
細胞形態(tài):成纖維細胞樣
傳代特性:可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)優(yōu)良
消化液:0.25%
培養(yǎng)條件:氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞傳代及凍存:
細胞傳代步驟 | 細胞凍存步驟 |
如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 | 待細胞生長狀態(tài)良好時,可進行細胞凍存。下面T25瓶為例; 1.細胞凍存時,棄去培養(yǎng)基后,PBS清洗瓶底1-2次后加入1ml,細胞變圓脫落后,加入2ml培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計數(shù)板計數(shù)。 2.1000RPM離心5分鐘去掉上清。用血清重懸浮,加DMSO至最終濃度為10%。加入DMSO后迅速混勻,按每1ml的數(shù)量分配到凍存管中,注意凍存管做好標(biāo)識。本公司按每個凍存管細胞數(shù)目大于1X106個細胞凍存。3.將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80度冰箱,至少2個小時以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。 |
原代細胞的培養(yǎng)方法一般有以下4種:
① 組織塊培養(yǎng)法
組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中,瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層,以利于組織塊粘著于瓶壁,使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。
?、?消化培養(yǎng)法
③ 懸浮細胞培養(yǎng)法
對于懸浮生長的細胞,如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化,可采用低速離心分離,直接培養(yǎng),或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。
?、芷鞴倥囵B(yǎng)
器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后,不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng),器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性,可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響,以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。
公司正在出售的產(chǎn)品:
小鼠白介素 -18 (mouse IL-18) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 Biosource
小鼠白細胞抑制因子 (mouse LIF) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 美國 R&D
小鼠淋巴細胞趨化因子 (mouse Lymphotactin) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T
小鼠單核細胞趨化蛋白 -1 (mouse MCP-1) 作用: ELISA 規(guī)格: 96T 奧地利 Bender
小鼠壞死因子相關(guān)凋亡誘導(dǎo)配體3(AIL-R3)ELISA 試劑盒 96T/48T
Human ai cardiolipin aibody IgA (ACA-IgA) ELISA Kit 人抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒
Humandopachrometaomerase,DTELISAKit 人多巴色素異構(gòu)酶(DT)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforACA(Mouseai-cenolandcenosomeaibody)ELISAKit小鼠抗中性粒/中心體抗體
一步法膠回收試劑盒20次
MouseorphaninFQ/nociceptin,OFQ/NELISAKit小鼠孤腓肽(OFQ/N)試劑盒規(guī)格:96T/48T
LIMD2蛋白抗體
鉀離子通道Kir2.1抗體
EFNB1重組小鼠 Ephrin-B1 / EFNB1 蛋白 Protein
APP695-770 (Amyloid protein precursor 0.5mgAPP695-770 (Amyloid protein precursor) 淀粉樣肽前體蛋白(多肽抗原)
MS4A1重組人 CD20 / MS4A1 蛋白 (aa 213-297, His 標(biāo)簽) Protein
ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標(biāo)簽)
CNTN3 Protein Rat 重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白
白介素1α(IL1α)重組蛋白 Recombinant Interleukin 1 Alpha (IL1a)
ERN1 Protein Human 重組人 ERN1 / IRE1 蛋白 (aa 465-977, His & GST 標(biāo)簽)
SMPD1重組小鼠 SMPD1 / ASM 蛋白 Protein
IFNAR1 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 IFNAR1 / IFNAR 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
CPNE1重組人 CPNE1 / Copine I / CPN1 蛋白 Protein
兔睪丸間質(zhì)細胞大鼠免疫球蛋白樣EGF樣域酪酸激酶1(Tie1)試劑盒 ,英文名: Tie1 ELISA Kit
Mouse insulin receptor beta (ISR- beta) ELISA Kit 小鼠胰島素受體β(ISR-β)試劑盒
RatCytochrome-C,Cyt-CELISAKit 大鼠(Cyt-C)試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforGFAP(Humanglialfibrillaryacidicprotein)ELISAKit人神經(jīng)膠質(zhì)纖維酸性蛋白
細胞甘油激酶(Glycerolkinase)活性酶連續(xù)反應(yīng)比色法定量試劑盒20次
RatSolubleClusterofdiffereiation40ligand,sCD40LELISAKit大鼠可溶性CD40配體(sCD40L)試劑盒規(guī)格:96T/48T
原代細胞的培養(yǎng)條件:
一、靜置貼壁細胞(包括半貼壁細胞的培養(yǎng))培養(yǎng)
1、細胞要通過充分漂洗,以盡量除去消化液的毒性;
2、細胞接種時濃度要稍大一些,至少為5×108細胞/L;
3、培養(yǎng)基可用Eagle(MEM Corning 10-010-CVR)或DMEM(Corning 10-013-CVR)培養(yǎng);
4、 胎牛血清濃度為10%-80%
5、應(yīng)在37℃5% CO2的培養(yǎng)箱中培養(yǎng);
6、在起始的2天中盡量減少振蕩,以防止剛貼壁的細胞發(fā)生脫落,漂??;
7、待細胞基本貼壁伸展并逐漸形成網(wǎng)狀,應(yīng)將原代細胞換液;
8、用骨髓或外周血中的懸浮細胞經(jīng)靜置培養(yǎng)1周時,應(yīng)將細胞懸液經(jīng)低速離心后換液。
二、懸浮細胞培養(yǎng)
1、原代培養(yǎng)時要盡量去除紅細胞;
2、短期培養(yǎng),可在含10%小牛血清的RPMI1640培養(yǎng)基中進行;
3、細胞濃度可在5-8×109/L范圍內(nèi),進行分瓶試驗;
4、長期培養(yǎng)時,淋巴細胞中要加入生長因子,白血病細胞中要加入少量的原患者血清,以利細胞生長;
5、細胞換液一般每隔3天需半量換液一次;
6、細胞傳代一般待細胞增殖加快、細胞密度較高時才能進行。